產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):PSD95抑制劑(Tat-NR2B9c)
英文名稱(chēng):Tat-NR2B9c
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Tat-NR2B9c是一個(gè)PSD95的抑制劑,EC50值是7nM,也能抑制p38. 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):500992-11-0 純度:98.22% 分子量:2518.88 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
釀酒酵母PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SMAD4 Antibody冠蛋白1B(CORO1B)
產(chǎn)阿拉伯糖漢遜酵母生物標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SMAD6 Antibody冠蛋白1A(CORO1A)
釀酒酵母辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SMAD5 Antibody寡糖轉(zhuǎn)移4(OST4)
大腸埃希氏菌羅丹明標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SMAD5 Antibody寡膈蛋白1(OPHN1)
戴爾根霉FITC標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SMAD6 Antibody胍基丁脲水解(AGMAT)
豇豆慢生根瘤菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SMARCA2 Antibody鈷傳遞蛋白Ⅱ(TCN2)
復(fù)輪生小克銀漢霉Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SMAD9 Antibody骨形成蛋白6(BMP6)
馬鏈球菌馬亞種Cy5標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SMC3 Antibody(PB0789)骨形成蛋白1(BMP1)
大腸埃希氏菌Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SMARCAD1 Antibody骨調(diào)蛋白(OMD)
變幻青霉Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SMARCA4 Antibody骨髓基質(zhì)抗原2(BST2)
腸桿菌屬Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SMC4 Antibody骨髓基質(zhì)抗原1(BST1)
枯草芽孢桿菌膠體金標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SMN1/2 Antibody骨肉瘤放大基因9(OS9)
鉤狀木霉堿性磷(AP)標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SMOX Antibody骨膜蛋白(POSTN)
假單胞菌膠體金標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SMC6 Antibody骨骼肌特異性受體酪激(MUSK)
*櫻桃鏈格孢FITC標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SMTN Antibody骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)
紅硬囊果青霉辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SMURF1 Antibody骨骼肌慢肌肌鈣蛋白I(TNNI1)
谷受體3A抗體類(lèi)高加索奶乳桿菌大鼠腎成纖維細(xì)胞提取物
谷受體3B抗體谷棒桿菌Ⅰ型大鼠腎足突細(xì)胞提取物
谷受體3A+3B抗體費(fèi)比恩畢赤酵母大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞提取物
神經(jīng)元引導(dǎo)蛋白3抗體乙酰短桿菌大鼠皮下脂肪細(xì)胞提取物
PSD95抑制劑(Tat-NR2B9c)少根根霉 3,5-二甲基-2-吡咯甲
玫瑰色野野村氏 苦參
植物乳桿 苦參堿
棲土曲霉 2,4,6-酰二苯氧磷
雜色曲霉 苦參K
新月彎孢紅曲霉 聯(lián)甲苯
大麗輪枝孢 苯丁酸
牡丹葡萄孢(都不提供) 硫代硫酸銨
楊奇青霉 豆甾
芽胞桿 氨甲環(huán)酸
假單胞屬 β-谷甾烷
黃曲霉 2-乙烷磺酸鈉
Paenibacillus odorifer 蒿草酚A
類(lèi)阿達(dá)青霉 4-羥基
青霉屬 甲基 4-咖啡??崴狨?nbsp;
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)