CDK8andWnt抑制劑(Wogonin)公司正在出售的產(chǎn)品：Cyclin F/FITC 熒光標(biāo)記周期F抗體IgG異辛烷 99%
Cyclin G/FITC 熒光標(biāo)記周期G抗體IgG異辛烷 AR,97%
Cyclin H/FITC 熒光標(biāo)記周期H抗體IgG異辛烷 for HPLC, >97% (GC)
Cygb/FITC 熒光標(biāo)記球蛋白抗體IgG異辛烷 光譜純
CYP450/FITC

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）,。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),，加入細(xì)胞培養(yǎng)液,，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

大腸埃希氏菌兔子堿性成纖維生長(zhǎng)因子Anti-LDLRAD3 Antibody人型肝炎IgG(HCV-IgG)

Marella suaedae人結(jié)締組織活化肽ⅢAnti-LGALS2 Antibody人型肝炎IgG(HCV-IgG)

玫瑰小雙孢菌大鼠白介7Anti-LEF1 Antibody人糖蛋白130(gp130)

釀酒酵母人巨噬集落激因子受體Anti-LEFTY1 Antibody人糖蛋白130(gp130)

金黃回旋鏈霉菌兔子前列腺E2Anti-LFNG Antibody人促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)

熱紫鏈霉菌不滲透亞種魚(yú)促卵泡Anti-LFNG Antibody人促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)

核桃殼囊孢菌小鼠β-防御Anti-LGALS7 Antibody人去加壓/1-去基-8-右旋-精加壓(dDAVP)

多形布勒擔(dān)子酵母凋亡原位（我公司提供代測(cè)服務(wù)）Anti-LGALS8 Antibody人去加壓/1-去基-8-右旋-精加壓(dDAVP)

香菇(L988)大鼠絲/蘇蛋白磷Anti-LGALS9 Antibody人蕈堿型乙酰受體亞型M3(M-AChR M3)

地衣芽孢桿菌魚(yú)促黃體激Anti-LHCGR Antibody人蕈堿型乙酰受體亞型M3(M-AChR M3)

盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽Anti-LIG3 Antibody人睪受體(TR)

蠟蚧菌人免疫球蛋白A Fc段受體ⅠAnti-LILRA1 Antibody人睪受體(TR)

IBV M41 HAR/HI serum 陽(yáng)性血清（荷蘭引進(jìn)）兔子5羥色Anti-LIG4 Antibody人蕈堿型乙酰受體(M-AChR)

間型串珠鐮孢兔子β內(nèi)啡肽Anti-LILRA2 Antibody人蕈堿型乙酰受體(M-AChR)

昆明鏈霉菌小鼠神經(jīng)絲蛋白Anti-LILRA4 Antibody人糖蛋白49A(Gp49a)

蘇云金芽孢桿菌蘇云金亞種魚(yú)磷化腺苷活化蛋白激Anti-LILRA5 Antibody人糖蛋白49A(Gp49a)

視黃醛結(jié)合蛋白1抗體克魯斯假絲酵母小鼠肺腺癌細(xì)胞系

環(huán)指蛋白5抗體E3泛蛋白連接RNF5綠色鏈霉菌人肺癌細(xì)胞

核糖體蛋白L15抗體地生翅孢殼昆蟲(chóng)細(xì)胞

核糖體蛋白L19抗體奇異翅孢殼鼠黑色瘤細(xì)胞
CDK8andWnt抑制劑(Wogonin)炭疽芽孢桿 哈氏豆屬酸

大腸埃希 九里香內(nèi)酯

假單胞屬 Griselinoside

植物乳桿植物亞種 Goniotriol

枯草芽孢桿 Glycozolinine

那波鏈霉 粗毛甘草 A

生癌腸桿 算盤(pán)子二

干小皮傘 海堿B

黑曲霉 靈芝F

雜色曲霉原變種 高良姜萜內(nèi)酯

松口蘑 Futoquinol

長(zhǎng)雙歧桿 Flavaprin

假中間葡萄球 Fargesone A

疣孢 Exoticin

粗柄羊肚 穆茱萸內(nèi)酯