Eg5ATPase活性抑制劑(K858)公司正在出售的產(chǎn)品：anti-OCLN(Occluding)/FITC 熒光素標(biāo)記人咬合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-dog IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗狗IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
周期素依賴性激酶2抗體 Anti-CDK2 0.1m

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細(xì)胞,，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,，加入細(xì)胞培養(yǎng)液,，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞,，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,，繪制雙色散點圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán),。

小鼠組織蛋白酶D(CTSD)ELISA試劑盒 ，英文名： CTSD ELISA Kit

綿羊白介素2(IL-2)ELISA檢測試劑盒SheepIerleukin2,IL-2ELISAKit 96T/48T

犬胰島素受體β(ISR-β)免疫試劑盒 Canine Insulin Receptor β,ISR-β ELISA KIT

英文名稱Mouse8-iso-ProstaglandinF2aELISAKIT小鼠8-異前列腺素F2α(8-ISOPGF2a)規(guī)格：96T/48T

不溶性GST融合蛋白溶解試劑盒10次

ratfollicle-stimulatinghormone,FSHELISA試劑盒大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素29(IL-29)ELISA試劑盒 ,，英文名： IL-29 ELISA Kit

大鼠白介素9(IL-9)ELISA檢測試劑盒RatIerleukin9,IL-9ELISAKIT 96T/48T

人Toll作用蛋白(TOLLIP)免疫試劑盒 Human TOLLIP ELISA Kit

英文名稱RatneuropeptideYELISAKit小鼠神經(jīng)肽(NPY)規(guī)格：96T/48T

TNFALPHA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次

Rabbitmaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISA試劑盒兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

People of cyclooxygenase 2 (COX-2) ELISA Kit 人環(huán)加氧酶2(COX-2)ELISA試劑盒

Rabbiturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 兔尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforAP13(Humanapelin13)ELISAKit人apelin13規(guī)格：48T/96T

血清樣品樹脂法去內(nèi)毒素試劑盒20次

PorcineIerleukin18,IL-18ELISAKit豬白介素18(IL-18)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Eg5ATPase活性抑制劑(K858)SMARCA2 英文名稱： ATP依賴解旋酶SMARCA2抗體 0.2ml

EGFL7 英文名稱： 類表皮生長因子域7抗體 0.1ml

硫酯包含蛋白-1抗體 Anti-Thioster-containing protein 1 1ml

Anti-TM/Biotin 生物素化血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-LAT (Tyr171) 磷酸化T細(xì)胞活化連接蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

BAFF/CD257(B cell activating factor) TNF家族B細(xì)胞激活因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg