公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進化,;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Cdc28p和Pho85p激酶抑制劑(NG 52)
英文名稱:NG 52
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
NG52(Compound52)是可滲透入細(xì)胞的,,可逆的,非ATP競爭性的細(xì)胞周期調(diào)節(jié)激酶Cdc28p和Pho85p激酶抑制劑,,IC50分別為7μM和2μM,。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:212779-48-1 別名:Compound 52 分子量:346.81 儲存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
小鼠重肽鐵蛋白(FTH)ELISA試劑盒 ,,英文名: FTH ELISA Kit
犬1(VK1)ELISA檢測試劑盒CanineVitaminK1,VK1ELISAKit 96T/48T
犬特殊基團成分(維蛋白)(GC)免疫試劑盒 Dog Vitamin D-binding protein,GC ELISA kit
英文名稱HumanGranulocyteChemotacticProtein-2ELISAKit人中性粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2)規(guī)格:96T/48T
超氧化物歧化酶(SOD)細(xì)菌裂解樣品制備試劑盒50次
Ratgrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISA試劑盒大鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-18 ELISA Kit
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA檢測試劑盒RatVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 96T/48T
人SPARC相關(guān)模塊化鈣結(jié)合蛋白2(SMOC2)免疫試劑盒 Human SMOC2 ELISA Kit
英文名稱MouseGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptideELISAKit小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
VEGF(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
Rabbitp53/tumorprotein,p53/TP53ELISA試劑盒兔p53(p53)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬(Coisol)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human parathyroid hormone related protein (PTHrP) ELISA Kit 人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒
guineapigImmunoglobulinE,IgEELISAKit 豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforANA(Humanai-nucleolusaibody)ELISAKit人抗核仁抗體規(guī)格:48T/96T
血液谷氨酸草酰乙酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活性光譜法定量檢測試劑盒20次
PorcineCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Cdc28p和Pho85p激酶抑制劑(NG 52)BRG-1 英文名稱: 抑癌基因SNF2β抗體 0.1ml
FLAG Tag 英文名稱: FLAG Tag標(biāo)簽抗體(N端) 0.1ml
髓過氧化物酶抗體 Anti-MPO 0.1ml
Anti-SCN2A/FITC 熒光素標(biāo)記電壓閥門鈉通道蛋白a2/癲癇相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr740) 磷酸化血小板源性生長因子受體-B抗體 規(guī)格 0.1ml
ADM (Adrenomedullin)(22-52) 腎上腺髓質(zhì)素(22-52)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1mg