exportin-1抑制劑(KPT-8602)公司正在出售的產(chǎn)品：Lp- Alpha(Mouse lipoprotein Alpha) ELISA Kit 小鼠脂蛋白α硝鉻 99.95% metals basis
Big ET(Mouse Big Endothelin) ELISA Kit 小鼠大內(nèi)皮硫鈷，七水 AR,，99.5%
F VIII -Ag(Mouse coagulation fac

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細(xì)胞,，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,，加入細(xì)胞培養(yǎng)液,，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞,，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光,，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán)。

釀酒酵母Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLIT1 Antibody胱天蛋白7(CASP7)

大腸埃希氏桿菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLK Antibody胱天蛋白6(CASP6)

綠色木霉Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLK Antibody胱天蛋白5(CASP5)

棘青霉PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SMAD1 Antibody胱天蛋白4(CASP4)

大腸埃希氏桿菌PE-Cy7標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SMAD1 Antibody胱天蛋白3(CASP3)

茄鏈格孢Cy7標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLPI Antibody胱天蛋白2(CASP2)

冠突曲霉堿性磷（AP）標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-Smad1/2/3/5  Antibody胱天蛋白14(CASP14)

哈茨木霉膠體金標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-Smad1/2/3/5  Antibody胱天蛋白12(CASP12)

格氏李斯特氏菌Cy5.5標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-Smad1/2/3/5  Antibody胱天蛋白11(CASP11)

魯考弗美奇酵母堿性磷（AP）標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SMAD1/5  Antibody胱天蛋白1(CASP1)

紅色游動微菌FITC標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-Smad1/5  Antibody光導(dǎo)蛋白(PDC)

大豆慢生根瘤菌PE-Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SMAD2 Antibody冠蛋白7(CORO7)

少根根霉Cy5標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SMAD2/3  Antibody冠蛋白6(CORO6)

Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SMAD3 Antibody冠蛋白2B(CORO2B)

假單胞菌Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SMAD3 Antibody冠蛋白2A(CORO2A)

Rhizobium multihospitiumAPC標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SMAD2 Antibody冠蛋白1C(CORO1C)

富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體大孢地霉大鼠子宮頸上皮細(xì)胞提取物

富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體赤曲霉大鼠腎管狀上皮細(xì)胞提取物

核仁蛋白3抗體產(chǎn)紅青霉大鼠輸尿管上皮細(xì)胞提取物

核孔蛋白1抗體紅色紅曲大鼠尿道上皮細(xì)胞提取物
exportin-1抑制劑(KPT-8602)釀酒酵母 對乙酰氨基酚

楊柳毛栓 1,2-二羥基-3-甲基蒽醌

短小芽孢桿 2,1,3-苯并噻二唑

東北擬青霉 Trans-咖啡酸

小孢根霉華變種 硫酸鋁

巨型艾美耳球蟲 16-氧代澤瀉A

海水芽孢桿 磷酸氫氨鈉

白靈側(cè)耳 5,6-二甲苯并咪唑

繩狀籃狀 澤瀉 E 23-醋酸酯

乳酸片球 5-乙?；?2-溴吡啶

膠韌革 澤瀉C

彎曲芽孢桿 香草酸

無色桿 澤瀉 A 23-醋酸酯

溫特曲霉原變種 三(3-磺酸鈉基苯基)膦

黑曲霉 雞屎藤次苷