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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-21 12:21:51瀏覽次數(shù)：262
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 500T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X9640 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 | 英文名稱 | CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit | 500T | 1～3天 |
商品介紹：
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 是基于CFDA, SE對(duì)細(xì)胞進(jìn)行示蹤及增殖檢測的試劑盒,，由CFDA,SE粉末、溶劑及相關(guān)細(xì)胞染色緩沖液組成,，該試劑盒主要工作原理為：CFDA, SE具有細(xì)胞膜滲透性,，本身不具有熒光發(fā)光性。當(dāng)通過被動(dòng)運(yùn)輸穿透細(xì)胞膜進(jìn)入活細(xì)胞后,，可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester, CFSE）,，后者可發(fā)強(qiáng)烈的綠色熒光，不能穿透細(xì)胞膜,，能完好的保留在胞內(nèi),。CFSE還可自發(fā)性并不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基結(jié)合從而偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上，同時(shí)過量且未被偶聯(lián)的CFDA, SE通過被動(dòng)擴(kuò)散回到細(xì)胞外培養(yǎng)基內(nèi),，被后續(xù)清洗步驟所清除,。經(jīng)CFDA, SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標(biāo)記的時(shí)間可達(dá)數(shù)月,，因此非常適用于細(xì)胞群落分析,。 CFDA, SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使用的其他細(xì)胞示蹤熒光探針如PKH26,，并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一,。在細(xì)胞分裂增殖過程中，CFSE 標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,，熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半,，通過流式細(xì)胞儀（FL1通道）根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同，可檢測出未分裂細(xì)胞,，分裂一次（1/2的熒光強(qiáng)度）,，二次（1/4的熒光強(qiáng)度），三次（1/8的熒光強(qiáng)度）,，以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞,。CFSA，SE可檢測分裂次數(shù)多達(dá)八次甚至更多,。經(jīng)CFDA, SE標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,，且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能。CFDA, SE常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測,，也可用于成纖維細(xì)胞,，自然殺傷細(xì)胞，造血祖細(xì)胞等其他細(xì)胞的增殖檢測,。 CFDA, SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,，Ex=494nm,，Em=521nm，除了流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞增殖外,，還可用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目,，或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。 本品為CFDA,，SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒,，包含配制CFDA，SE儲(chǔ)存液所需的溶劑和細(xì)胞標(biāo)記用的染色緩沖液,，簡化了實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備工作,。另，CFDA,SE標(biāo)記細(xì)胞一般15min即可完成,，對(duì)于不同細(xì)胞,，需要自行摸索佳標(biāo)記時(shí)間。按照每個(gè)樣本的標(biāo)記體積為2ml計(jì)算,。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來,，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次,。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min,。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）,。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán)。
解整合金屬蛋白9(ADAM9)英文名稱：ADAM9 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白62抗體包裝250mg
解整合金屬蛋白8(ADAM8)英文名稱：ADAM8 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白64抗體包裝25g
結(jié)合珠蛋白(Hpt)英文名稱：Hpt ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白72抗體包裝5g
接觸蛋白1(CNTN1)英文名稱：CNTN1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白73抗體包裝100g
窖蛋白(CAV1)英文名稱：CAV1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白74B抗體包裝25g
角質(zhì)轉(zhuǎn)谷酰胺(TGM1)英文名稱：TGM1 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框25抗體包裝5g
角蛋白9(KRT9)英文名稱：KRT9 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框42抗體包裝100g
角蛋白18(KRT18)英文名稱：KRT18 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框44抗體包裝25g
膠質(zhì)細(xì)胞系來源神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)英文名稱：GDNF ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框48抗體包裝500g
腱蛋白樣蛋白2(CHRDL2)英文名稱：CHRDL2 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框50抗體包裝100g
堿性鞘磷脂磷二酯(Alk-Smase)英文名稱：Alk-Smase ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框51抗體包裝25g
堿性成纖維細(xì)胞生長因子(FGF2)英文名稱：FGF2 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框52抗體包裝5g
剪接因子3B亞基3(SF3B3)英文名稱：SF3B3 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框55抗體包裝1g
間隙連接蛋白43(CX43)英文名稱：CX43 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框56抗體包裝5g
間皮(MSLN)英文名稱：MSLN ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框57抗體包裝25g
: T63資源名稱: 傷寒沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品脂肪結(jié)合蛋白4試劑盒羊蹄;Nepodin
米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格：> 99%,EP脂肪甘油三酯脂試劑盒異肥皂草苷;Isosaponarin
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品脂肪分化相關(guān)蛋白試劑盒異七葉皂苷Ib;Isoescin Ib
細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒露濕粘座孢霉（或露濕漆斑） 4-(4-氟苯甲?；?丁酸中期因子Elisa
殼囊孢屬 三氟磺酸中性粒彈性蛋白Elisa
穗狀平臍蠕孢 美羅培南側(cè)鏈中性粒防御-1Elisa
芽胞桿 泰諾福韋中性粒防御1-3Elisa
紫色直絲鏈霉 固甾酮中性粒明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白Elisa
布氏乳桿 4-溴苯基乙酸乙酯中性內(nèi)肽;腦啡肽Elisa
黑木耳 2,5-二溴苯甲腫瘤M2型酮酸激Elisa
豬丹絲 氨基二酸二乙酯鹽酸鹽腫瘤標(biāo)志物Elisa
干燥棒桿* 腫瘤抗原Elisa
果生鏈核盤 3,4,5-三氟腫瘤壞死因子αElisa
青紫鏈霉 8-氟喹唑啉-（2,4）二酮腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白6Elisa
黑荊樹根瘤 2,3,4,5-四氟腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化Elisa
根瘤 3-氯-2,5-二甲基吡腫瘤壞死因子βElisa
藏紅深黃孔 N,N-二甲基甘氨酸腫瘤壞死因子γElisa
中華根霉 2-溴-3-氟腫瘤壞死因子可溶性受體ⅠElisa
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