BCRP抑制劑（YHO-13177）公司*的產(chǎn)品：Tubulin- Beta/FITC 熒光標(biāo)記微管蛋白抗體IgG
Tubulin- Gamma/FITC 熒光標(biāo)記微管蛋白-γ抗體IgG
Beta-Actin/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記β-肌動(dòng)蛋白（抗體）
Tuberin/TSC2/FITC 熒光標(biāo)記馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgG
Phospho-Tuberin/TSC2 (T

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,；

②生物膜與細(xì)胞器的研究,；

③細(xì)胞骨架體系的研究,；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：BCRP抑制劑（YHO-13177）

英文名稱：YHO-13177

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二,、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

操作規(guī)程

1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2,、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3,、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時(shí),，使MTT 還原為甲臜。

6,、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8,、結(jié)果分析

a,、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無細(xì)胞）,，各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值,，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

大腸埃希氏菌(大腸桿菌)*Bacillus lentus大鼠苗條受體(LR/Ob-R)

NesterenkoniaBacillus coagulans大鼠瘦(LEP)

匍柄霉Bacillus circulans大鼠瘦(LEP)

解淀粉芽孢桿菌Bacillus megaterium大鼠白血病抑制因子(LIF)

矩圓黑盤孢Bacillus cereus大鼠白血病抑制因子(LIF)

莫爾氏假單胞菌Bacillus cereus大鼠L選擇(L-Selectin/CD62L)

阿姆斯特丹曲霉Bacillus pumilus大鼠L選擇(L-Selectin/CD62L)

枯草芽孢桿菌Bacillus circulans大鼠單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)

杏鮑菇Bacillus cereus大鼠單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)

大腸埃希氏桿菌Bacillus pumilus大鼠單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)

南假單胞菌Bacillus cereus大鼠單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)

糙皮側(cè)耳Bacillus cereus大鼠單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)

束紅球菌Bacillus thuringiensis大鼠單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)

線形大洋螺菌Bacillus coagulans大鼠巨噬集落激因子(M-CSF)

Janibacter melonisBacillus thuringiensis大鼠巨噬集落激因子(M-CSF)

豬鏈球菌Bacillus cereus大鼠巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)

抵抗抗體白蟻梭菌鏈球菌

細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體復(fù)制因子C馬瑞氏熱厭氧桿菌坂崎腸桿菌

S6核糖體蛋白抗體夾膜紅細(xì)菌馬德亞沙門氏菌

細(xì)胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體類球紅細(xì)菌雷丁沙門氏菌
BCRP抑制劑（YHO-13177）秦氏蜜環(huán) 水蘇糖

球毛殼 水楊苷

弗氏檸檬酸桿 松三糖

丘狀落乳桿 蜜二糖

毛豆炭疽病 D-甘露糖鹽酸鹽

棒隔指孢 菊糖

香菇 巖藻多糖

Hymenobacter L（-）巖藻糖

米根霉 赤蘚糖

Subsaxibacter 衛(wèi)矛

類干酪乳桿類干酪亞種 低聚半乳糖

Nocardioides 低聚木糖

安薇芽孢桿 抗壞血酸-6-棕櫚酸酯

西比隆醋桿 亞麻木

變紫青霉 三蔗糖