商品介紹:
英文名稱:checkpoint kinase inhibitor 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg AZD-7762是一種有效的ATP競爭性的細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激酶(checkpoint kinase,,Chk)抑制劑,,抑制Chk1,,IC50為5nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:860352-01-8 純度:98.68% 分子式:C??H??FN?O?S 分子量:362.42 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激酶抑制劑(AZD-7762)
英文名稱:checkpoint kinase inhibitor
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
大腸埃希氏菌艾滋病病抗體Human SPANXE ELISA Kit大鼠雌三(E3)免疫試劑盒
桿狀毛霉結(jié)合珠蛋白相關(guān)蛋白抗體Human SPA17 ELISA Kit大鼠雌激硫轉(zhuǎn)移(SULT1E1)免疫試劑盒
雜色曲霉L-組脫羧抗體Human SLC29A1(EquilibRative nucleoside transporter 1) ELISA Kit大鼠雌激(E)免疫試劑盒
馬克斯克魯維酵母乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白Human Spartin/SPG20 ELISA Kit大鼠雌二受體(ER)免疫試劑盒
鞘盒菌屬組蛋白H2B.s抗體Human SPACA3 ELISA Kit大鼠雌二(E2)抗體免疫試劑盒
產(chǎn)氣腸桿菌組蛋白去乙?;?/span>4+5+9抗體Human SPAM1 ELISA Kit大鼠雌二(E2)免疫試劑盒
假單胞菌屬熱休克蛋白27相關(guān)蛋白1抗體Human SPACA1 ELISA Kit大鼠垂草扁桃(VMA)免疫試劑盒
馬闊里類芽孢桿菌卟膽原脫抗體Human SPAG11A ELISA Kit大鼠穿孔/成孔蛋白(PF/PFP)免疫試劑盒
球孢白僵菌異質(zhì)核糖核蛋白U2樣蛋白抗體Human SPANXA2/SPANXA1 ELISA Kit大鼠成纖維生長因子9(FGF9)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌肝癌衍生生長因子2抗體Human SPANXB1 ELISA Kit大鼠成纖維生長因子8(FGF8)免疫試劑盒
球孢鏈霉菌肝癌相關(guān)抗原57抗體Human SPANXC ELISA Kit大鼠成纖維生長因子23(FGF-23)免疫試劑盒
平菇補(bǔ)體C3抗體Human SP6 ELISA Kit大鼠成纖維生長因子13(FGF-13)免疫試劑盒
玫煙色棒束孢甲型流感病血凝抗體Human SPA17 ELISA Kit大鼠成纖維生長因子10(FGF10)免疫試劑盒
污黑腐皮殼甲狀旁腺功能亢進(jìn)蛋白2/分裂周期73抗體Human SPANXE ELISA Kit大鼠巢蛋白(NID)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母線粒體絲蛋白抗體Human Spartin/SPG20 ELISA Kit大鼠超氧化物歧化1,可溶性(SOD1)免疫試劑盒
大西洋魯杰氏菌/鈉超化激活環(huán)核苷門控通道蛋白2抗體Human SLC29A1(EquilibRative nucleoside transporter 1) ELISA Kit大鼠超氧化物歧化[錳],線粒體(SOD2)免疫試劑盒
血紅栓菌Trametes│sanguinea 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品紫菀
沉積物海源菌Idiomarina│sediminum 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC)白鮮堿
大腸埃希氏菌DH5α/pBH10-P(-)vif(-)Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品q
細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激酶抑制劑(AZD-7762)小單孢 Clopidogrel Bisulfate絨毛膜促性腺抗體Elisa
枯草芽孢桿 化銨-d4雌二Elisa
洪吉氏 氫氧化鈰黃體生成Elisa
硬毛栓孔 碳化鉻促卵泡Elisa
毛頭鬼傘 六化鑭促性腺釋放Elisa
黑球漆斑 四酸鋰催乳Elisa
釀酒酵母 化鎢胰島樣生長因子1Elisa
氧化節(jié)桿 化二鉻麻疹病Elisa
草菇 砷化鎘傳染性貧血Elisa
金黃色葡萄球 R-(+)-傳染性腦脊髓炎Elisa
球孢白僵 多萘哌齊堿傳染性胸膜肺炎Elisa
枯草芽孢桿 2-苯基-5-噁唑酮乙型腦炎病Elisa
平菇(側(cè)5) 3-溴甲基-5-苯并噻吩傳染性貧血抗體Elisa
大腸埃希氏 鄰硝基二苯前列腺F2αElisa
變異納西桿 (S)-3,3'-二溴-1,1'-聯(lián)-2-萘酚鼻疽Elisa