商品介紹:
Aglafoline抑制PAF誘導(dǎo)的血小板聚集,,IC50值為50μM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:143901-35-3 別名:Aglafolin;Rocaglamide U;(-)-Methyl rocaglate 純度:98.0% 分子量:492.52 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:血小板聚集抑制劑(Aglafoline)
英文名稱:Aglafoline
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
化琥珀酰膽堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amidopyrine/aminopyrine1號染色體開放閱讀框229抗體包裝1g
化(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Angiotensin II殺菌肽/天蠶抗菌肽抗體包裝25g
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Vitamin D3Cullin 4a蛋白抗體包裝5g
化乙酰膽堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pazopanib HCl角蛋白3抗體包裝250mg
解磷定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tiotropium bromide anhydrous 5號染色體開放閱讀框52抗體包裝10mg
雷他定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Formoterol fumarate 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白85B抗體包裝50mg
霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Formoterol fumarate 緊密連接蛋白14抗體包裝1g
霉二物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Faropenem sodium人巨病單克抗體包裝100g
美扎(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Faropenem sodium癌胚抗原抗體包裝25g
諾昔康(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Orlistat(synthesis)表面趨化因子受體3抗體包裝500g
普噻噸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rifamycin sodium salt1號染色體開放閱讀框33抗體包裝1g
羥吡啶;吡多(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Octreotide acetate磷化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體包裝5g
屈膦二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (S)-(+)-2-Amino-1-butanol 磷化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體包裝100ml
噻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: trans-D-erythro-sphingosine磷化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體包裝25ml
噻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ribophytosphingosine hydrochloride磷化整合β2/Integrin β2抗體包裝1g
: =DSM40595=ATCC15722,CBS785.72,IMRU3751,ISP5595,JCM3045,JCM4805,RIA1445資源名稱: 橄欖色菌核鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>98,BR外基質(zhì)磷糖蛋白試劑盒褪黑;Melatonine
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR色P450c21B/21-羥化試劑盒通關(guān)藤苷H;Tenacissoside
: =AS2.1182資源名稱: 克魯斯假絲酵母 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品色P450c21A/21-羥化試劑盒脫穿心蓮內(nèi)酯琥珀半酯;Dehydro
血小板聚集抑制劑(Aglafoline)小鼠補(bǔ)體蛋白4浙貝母(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
小鼠鷓鴣菜(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
大鼠熱休克蛋白40珍珠(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
人天門冬轉(zhuǎn)/谷草轉(zhuǎn)珍珠母(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
大鼠熱休克蛋白20正丁酞;丁酞內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
人肝脂正二十九烷Human, Mouse
小鼠α2抗纖溶芝麻林(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
小鼠α2纖溶抑制物芝麻(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人乙酰肝知母(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat