公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:HSP90抑制劑(Debio 0932)
英文名稱:Debio 0932
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Debio0932(CUDC-305)是HSP90新穎的抑制劑,,在很多細(xì)胞癌癥中有很強(qiáng)的生物活性和抗增殖能力,。(IC50值是220nmol/L) 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1061318-81-7 別名:CUDC-305 純度:99.44% 分子量:442.58 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
膠胞羅丹明標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC5A2 Antibody過氧化物體增殖物激活受體γ(PPARγ)
草菇Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC5A1 Antibody過氧化物體增殖物激活受體α(PPARα)
鏈霉菌Cy5.5標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A1 Antibody過氧化物體生物合成因子2(PEX2)
蠟狀芽孢桿菌Cy5標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A1 Antibody過氧化還原6(PRDX6)
嗜堿假單胞菌Cy7標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A4 Antibody過氧化還原5(PRDX5)
棱柱散尾菌PE標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A4 Antibody過氧化還原4(PRDX4)
榛針孢酵母FITC標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A4 Antibody過氧化還原3(PRDX3)
枯草芽孢桿菌生物標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A4 Antibody過氧化還原2(PRDX2)
Cy5標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC7A5 Antibody過氧化還原1(PRDX1)
釀酒酵母生物標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC7A1 Antibody過氧蛋白同源物(PXDN)
解橡膠諾卡氏菌FITC標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC7A3 Antibody果糖二磷縮C(ALDOC)
土壤桿菌羅丹明標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC9A2 Antibody果糖-3-激(FN3K)
尖鐮孢PE-Cy3標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC9A1 Antibody(PB0176)歸巢關(guān)聯(lián)黏附分子(HCAM)
德蘭士瓦哈薩克斯坦酵母 PE-CY5標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC9A3R1 Antibody胱天蛋白激活脫氧核糖核(CAD)
Ohtaekwangia koreensisAPC標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLIT2 Antibody胱天蛋白9(CASP9)
泳池鞘單胞菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLK Antibody胱天蛋白8(CASP8)
增殖相關(guān)核仁抗原抗體芽枝狀枝孢大鼠卵巢顆粒細(xì)胞提取物
富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體運動發(fā)酵單胞菌大鼠子宮成纖維細(xì)胞提取物
NALP12抗體嚙蝕艾肯菌大鼠卵巢上皮細(xì)胞提取物
富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體伯頓擬內(nèi)孢霉大鼠子宮平滑肌細(xì)胞提取物
HSP90抑制劑(Debio 0932)巨大芽孢桿 β-巰基乙鹽酸鹽
蜂蜜曲霉 喹啉黃
Penicillium 8-氮鳥嘌呤
海泥黃桿 草甘二磷
蠟狀芽孢桿 異丹酚酸C
鏈球(不定種) 調(diào)環(huán)酸鈣
釀酒酵母 丹酚酸A甲酯
枯草芽孢桿 3-羥基-5-甲基異惡唑
型副傷寒沙門氏 地膚子皂苷Iia
云南擲孢酵母 噻苯咪唑
釀酒酵母 地膚子皂苷II
根癌農(nóng)桿GV3101 D-(+)-蘋果酸
桔青霉 竹節(jié)參皂苷V甲酯
豬瘟病 甘油三酯
樹舌靈芝 白花前胡香豆精I(xiàn)II