產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Btk激酶抑制劑(LFM-A13)
英文名稱:LFM-A13
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
LFM-A13是Btk激酶選擇性抑制劑,,IC50值為17.2uM,,也對PLK3有抑制作用,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:244240-24-2 純度:99.47% 分子量:360.0 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究,;
②生物膜與細胞器的研究,;
③細胞骨架體系的研究,;
④細胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細胞分化及其調(diào)控,;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化,;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
塔賓曲霉人半乳糖6硫酯Bacillus chitinolyticus小鼠降鈣原(PCT)
堅強芽孢桿菌人艾杜糖硫酯Bacillus circulans小鼠胰島自身抗體(IAA)
解脂假絲酵母解脂變種人β葡萄糖苷Bacillus circulans小鼠胰島自身抗體(IAA)
肉桂鏈霉菌人β葡糖苷Bacillus circulans小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)
根瘤菌人β內(nèi)酰Bacillus circulans小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)
牡丹葡萄孢人β甘露糖苷Bacillus circulans小鼠白介7(IL-7)
羊毛狀絲齒菌人β半乳糖苷Bacillus circulans小鼠白介7(IL-7)
多主葡萄殼菌人αL艾杜糖苷Bacillus circulans小鼠褪黑(MT)
白淺灰鏈霉菌人α2抗纖溶Bacillus circulans小鼠褪黑(MT)
肉色栓菌人N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷Bacillus circulans小鼠載脂蛋白H(Apo-H)
擬莖點霉屬人L解Bacillus circulans小鼠載脂蛋白H(Apo-H)
冬蟲夏草人5核苷Bacillus circulans小鼠熱休克因子1(HSF1)
莓實假單胞菌人1,3-βD葡葡糖苷Bacillus circulans小鼠熱休克因子1(HSF1)
豬丹絲菌人肌激Bacillus clarkii小鼠血小板因子3(PF-3)
松杉靈芝人靶向核糖核Bacillus clausii小鼠血小板因子3(PF-3)
枯草芽孢桿菌人蛋白激CBacillus coagulans小鼠白介2受體(IL-2R)
膜轉(zhuǎn)運蛋白XK抗體短裙竹蓀3-3人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株
軟骨細胞蛋白39抗體短裙竹蓀3-5大鼠雪旺細胞
14-3-3E蛋白抗體塊菌中國倉鼠卵巢細胞野生型
核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子YY1抗體短裙竹蓀2號(毛竹林)人肺微血管內(nèi)皮細胞
Btk激酶抑制劑(LFM-A13)枯草芽孢桿 蜂斗菜內(nèi)酯A
米根霉 風(fēng)信子
覆盆子酮
枯草芽孢桿 飛蓬酯乙
灰色變異鏈霉 飛蓬苷
德克薩斯萊茵海默氏 富馬酸
長枝木霉 扶桑甾
雜色曲霉 二氫歐山芹醋酸酯
枯草芽孢桿 二氫魚藤酮
雙孢蘑菇 二氫黃連堿
香菇 二氫草莓酸
罕見芽孢桿 二氫石蒜堿
澳型核果褐腐病 二氫
異常漢遜酵母 N,N’-二甲基蝙蝠葛堿化物
中國香柱 3,3'-O-二甲基鞣花酸
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)