公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究,;
②生物膜與細胞器的研究,;
③細胞骨架體系的研究,;
④細胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細胞分化及其調(diào)控,;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化,;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PAK抑制劑(KPT-9274)
英文名稱:KPT-9274
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
KPT-9274是PAK的抑制劑,,在MTT試驗中測定的IC50值小于100nM。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1643913-93-2 純度:99.28% 分子量:610.63 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細胞100μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
短波單胞菌屬粘合抗體(C端)腱糖蛋白-C(固生蛋白)抗體Anti-IL27B(EBI3) Antibody胎盤特異性蛋白9(PLAC9)
無花果曲霉糖皮質(zhì)激誘導腫瘤壞死因子受體抗體Anti-IL27 Antibody胎盤膠原凝集1(CLP1)
硫磺菌(硫色多孔菌)TANK抗體Anti-IL2RA Antibody胎盤堿性磷(ALPP)
大腸埃希氏菌脂多糖相關(guān)反應蛋白5/γ-taxilin抗體Anti-IL2RB Antibody胎盤鈣黏蛋白(CDHP)
黑木耳胸苷合成抗體Anti-IL2RG Antibody胎兒腎鈣黏蛋白(KCAD)
白僵菌硫氧還蛋白抗體Anti-IL2RB Antibody羧肽Z(CPZ)
產(chǎn)黃青霉腫瘤易感基因101蛋白抗體Anti-IL3 Antibody羧肽X2(CPX2)
尖孢鐮刀菌西瓜?;退姆肿咏宦?lián)體1抗體(四旋蛋白)Anti-IL3 Antibody羧肽X1(CPX1)
簡青霉四分子交聯(lián)體2抗體(四旋蛋白)Anti-IL3 Antibody羧肽O(CPO)
大腸埃希菌TTC33蛋白抗體Anti-IL3 Antibody羧肽N2(CPN2)
阿維菌鏈霉菌四分子交聯(lián)體3抗體(四旋蛋白)Anti-IL3 Antibody羧肽N1(CPN1)
大腸埃希氏桿菌T淋巴白血病同源蛋白2抗體Anti-IL3 Antibody羧肽M(CPM)
蚜蟲莫氏黑粉菌跨膜蛋白132A抗體Anti-IL3 Antibody羧肽E(CPE)
樟疫霉四聚體多肽蛋白21B抗體Anti-IL32 Antibody羧肽D(CPD)
楊生盾殼霉原肌球蛋白1抗體Anti-IL31 Antibody羧肽A6(CPA6)
Lysinibacillus xylanilyticus轉(zhuǎn)錄增強因子TEF3抗體Anti-IL33 Antibody羧肽A5(CPA5)
染色體特異性轉(zhuǎn)錄延伸因子抗體博拉迪酵母小鼠子宮平滑肌細胞
信號誘導增殖相關(guān)蛋白1樣蛋白2抗體融合魏斯氏菌小鼠卵巢上皮細胞
DNA聚合δ相互作用蛋白3抗體燦爛類芽胞桿菌小鼠子宮成纖維細胞
絲/蘇蛋白激SRPK2抗體茯苓(斜面)小鼠卵巢顆粒細胞
PAK抑制劑(KPT-9274)甲型副傷寒沙門氏 鎂、錳,、鉬,、鍶、,、釩,、鋅/Mg, Mn, Mo, Sr, Tl, V, Zn甲狀腺Elisa
西藏木霉 氟、,、溴,、硫酸根、亞硝酸根,、 硝酸根,、磷酸根/F, Cl, Br, SO4, NO2, NO3,胃饑餓Elisa
產(chǎn)氣莢膜梭 B型 氟、,、溴,、硫酸根、亞硝酸根,、硝酸根,、磷酸根/F, Cl, Br, SO4, NO2, NO3, P胃泌Elisa
釀酒酵母 氟、,、溴,、硫酸根,、亞硝酸根、硝酸根,、磷酸根/F, Cl, Br, SO4, NO2, NO3, P胰島Elisa
叢毛單胞 鈷,、鉻、鐵,、錳,、鎳、鈦,、釩/Co, Cr, Fe, Mn, Ni, Ti, V卵黃蛋白原Elisa
傳染性支氣管炎病 鎘,、鉻、銅,、鐵,、鎳、鉛,、鋅/Cd, Cr, Cu, Fe, Ni, Pb, Zn黃體生成Elisa
銅綠假單胞/綠膿桿 鎘,、鈷、鉻,、銅,、鐵、,、鋰/Cd, Co, Cr, Cu, Fe, K, Li促卵泡Elisa
巨大芽孢桿 鉍,、鍺、銦,、鋰,、鈧、鋱,、釔 /Bi, Ge, In, Li, Sc, Tb, Y成熟促進因子Elisa
空泡單胞 ,、鈣、鐵,、,、鋰、鎂,、鈉/B, Ca, Fe, K, Li, Mg, Na肌球蛋白Elisa
草酸青霉 金,、鈹、鎵,、鍺,、鉬、鈦,、鋯/Au, Be, Ga, Ge, Mo, Ti, Zr組氨酰tRNA合成Elisa
葡萄座腔 鋁,、,、銅、鐵,、鈦,、釩、鋯/Al, B, Cu, Fe, Ti, V, Zr脫3bElisa
腸膜明串珠 鋁,、,、鋇、鈹,、鈷,、鉬、鈦/Al, B, Ba, Be, Co, Mo, Ti狀腺原氨酸Elisa
變紅青霉 鋁,、砷,、鈷,、銅,、鐵、鎳,、鉛/Al, As, Co, Cu, Fe, Ni, Pb甲狀腺Elisa
多形擬桿 銦,、鉍、銅,、鐵,、鉛、鈀,、銻/Ag, Bi, Cu, Fe, Pb, Pd, Sb脫3bElisa
土地桿 銀,、鉍、銅,、鐵,、鉛、鈀,、銻/Ag, Bi, Cu, Fe, Pb, Pd, Sb白介10Elisa