商品介紹:
AVE0991為一種非肽類可Ang-(1-7)的激動劑,,對牛大動脈內(nèi)皮細胞中[125I]-Ang-(1-7)具有高親和力,,IC50值為21±35nM,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:304462-19-9 純度:99.16% 分子量:580.72 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水),。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞,。
對于貼壁細胞,,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,,離心收集細胞,共洗滌兩次,。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min,。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測),。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標,,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,,活細胞僅有很低強度的背景熒光,,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光,。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細胞膜完整性的細胞,,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
Tau蛋白(TAU)ELISA Kit英文名稱:TAU ELISA Kit溴脫氧尿苷抗體包裝5g
Slit2(Slit2)ELISA Kit英文名稱:Slit2 ELISA KitB遷移基因2抗體包裝1g
SCAF11蛋白(SFRS2IP/CASP11)ELISA Kit英文名稱:SFRS2IP/CASP11 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白2抗體包裝250mg
S100鈣結(jié)合蛋白A8/A9復合物(S100A8/A9)ELISA Kit英文名稱:S100A8/A9 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白7抗體包裝1g
S100蛋白(S-100)ELISA Kit英文名稱:S-100 ELISA Kitβ-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝10MG
S100-B蛋白(S100B)ELISA Kit英文名稱:S100B ELISA Kitβ-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝250mg
S100B蛋白(S100B)ELISA Kit英文名稱:S100B ELISA Kit癌易感基因2和p21蛋白抑制因子抗體包裝1g
RAR的相關(guān)孤獨受體C(RORC)ELISA Kit英文名稱:RORC ELISA Kit血型抗原前體蛋白抗體包裝5g
Qa淋巴細胞抗原2(Qa-2)ELISA Kit英文名稱:Qa-2 ELISA Kit凱爾血型糖蛋白CD238抗體包裝1g
P選擇糖蛋白配體1(PSGL-1)ELISA Kit英文名稱:PSGL-1 ELISA Kit嗜乳脂蛋白亞家族2成員A2抗體包裝250mg
P選擇(P-Selectin/CD62P)ELISA Kit英文名稱:P-Selectin/CD62P ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白10抗體包裝250mg
P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA Kit英文名稱:SP-R ELISA Kit溴脫氧尿苷單克抗體(增殖標志物)包裝1g
P物質(zhì)(SP)ELISA Kit英文名稱:SP ELISA KitBEND2蛋白抗體包裝25g
P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)ELISA Kit英文名稱:P-gp ELISA Kit骨涎蛋白包裝5g
p53(p53)ELISA Kit英文名稱:p53 ELISA Kit副溶血性弧菌菌體鞭毛蛋白抗體包裝1g
血管緊張Ⅱ受體2抗體肝核因子1α(HNF1α)Capadenoson (BAY 68-4986) is a new adenosine A1 receptor agonist.
Ang-(1-7)激動劑(AVE 0991)瞬時受體電位通道蛋白4抗體綠原 CHLOROGENIC ACID(P) (AHP Verified & Compendial Traceable)Human
腫瘤/抗原44抗體霉 CHLORAMPHENICOL(RG)Human, Mouse
癌、胃癌抗原GA55抗體α-糖 CHLORALOSE, a-(RG)Human, Mouse, Rat
轉(zhuǎn)化生長因子β調(diào)節(jié)蛋白4抗體α-糖 CHLORALOSE, a-(RG)Human, Mouse
酪蛋白激3抗體殼聚糖 CHITOSAN(RG)Human, Mouse
磷化酪蛋白激3抗體殼 CHITIN(RG)Human
瞬時受體電位離子通道蛋白1抗體(M亞家族)殼 CHITIN(RG)Human, Mouse
瞬時受體電位離子通道蛋白6抗體(M亞家族)CHETOMIN(RG)Human, Mouse, Rat
跨膜蛋白2樣蛋白抗體CHETOMIN(RG)Human, Mouse