商品介紹:
TCS JNK5a(JNK Inhibitor IX)對(duì)JNK3,JNK2,,JNK1和p38α的pIC50分別為6.7,,6.5,<5.0和<4.8,,對(duì)其它蛋白激酶則無(wú)明顯活性,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):312917-14-9 別名:JNK Inhibitor IX 純度:98.91% 分子量:332.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:JNK3/JNK2/JNK1和p38α抑制劑(TCS JNK 5a)
英文名稱:TCS JNK 5a
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA試劑盒 ,,英文名: MHCⅠ/H-2Ⅰ ELISA Kit
小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 96T/48T
人抗Smith抗體(Sm)免疫試劑盒 Human ai-Smith aibody ELISA Kit
Rat17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISAKit大鼠17羥孕同(17-OHP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞MAPK蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
IL-1βELISA試劑盒魚類白介素1β規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒
HumansubstancePreceptor,SP-RELISAKit 人P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
Humancardioophln1,CT-1ELISA試劑盒人心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品NOS基因檢測(cè)試劑盒20次
Humansolubleadhesionmolecules,,SamELISAKit人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human poliomyelitis virus IgG (PV-IgG) ELISA Kit 人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA試劑盒
guineapigfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforANG-II(HumanangiotensionII)ELISAKit人血管緊張素Ⅱ規(guī)格:48T/96T
血液鈣(Ca)定量檢測(cè)試劑盒50次
PorcineCoisolELISAKit豬皮醇(Coisol)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
JNK3/JNK2/JNK1和p38α抑制劑(TCS JNK 5a)STAU2 英文名稱: 雙鏈RNA結(jié)合蛋白Staufen2抗體 0.2ml
factor XIII 英文名稱: 13抗體(纖維蛋白穩(wěn)定因子) 0.2ml
錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗體 anti-MLH1 0.1ml
Anti-SEL1L/FITC 熒光素標(biāo)記SEL1L抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Paxillin(Tyr88) 磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 規(guī)格 0.1ml
Acinus peptide ACINUS 多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg