以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Hsp90抑制劑(VER-49009) | VER-49009 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
VER-49009是Hsp90抑制劑,,IC50為47nM,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:558640-51-0 別名:CCT 129397 分子量:387.82 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水),。
2) 對于懸浮細胞,,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,,加入細胞培養(yǎng)液,,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),,500-1000g離心5min收集細胞,。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,,離心收集細胞,,共洗滌兩次,。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,,使細胞濃度達到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標,。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán),。
小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ)ELISA試劑盒 ,英文名: MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA Kit
小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA檢測試劑盒Mouselipoproteinlipase,LPLELISAKit 96T/48T
人抗sp100抗體(sp100)免疫試劑盒 Human ai-sp100-aibody ELISA Kit
Rat17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISAKit大鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞JNK/SAPK蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次
IL-1αELISA試劑盒魚類白介素1α規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 ,,英文名: IL-1α ELISA Kit
大鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA檢測試劑盒RatIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit 96T/48T
人Stathmin 1(STMN1)免疫試劑盒 Human STMN1 ELISA Kit
英文名稱MousePGFELISAKit小鼠前列腺素F型(PGF)規(guī)格:96T/48T
TUBULIN蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次
RabbitOsteoprotegerin,OPGELISA試劑盒兔骨保護素(OPG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human hexokinase (HK) ELISA Kit 人己糖激酶(HK)ELISA試劑盒
guineapigiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit 豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforANG-II(MouseangiotensionII)ELISAKit小鼠血管緊張素Ⅱ規(guī)格:48T/96T
血液輔酶Q含量比色法定量檢測試劑盒20次
PorcineC-reactiveprotein,CRPELISAKit豬C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Hsp90抑制劑(VER-49009)Spindly 英文名稱: 亞砷鹽相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
F1 operon positive regulatory protein 英文名稱: 肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(C端) 0.2ml
間皮素抗體 Anti-MSLN 0.1ml
Anti-Selenoprotein W/FITC 熒光素標記硒蛋白W抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Paxillin(Tyr31) 磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 規(guī)格 0.1ml
ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23) 促腎上腺皮質(zhì)激素(7-23)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2mg