SIK抑制劑(HG-9-91-01)公司*的產(chǎn)品：Anti-Kif14 protein /FITC 熒光素標(biāo)記驅(qū)動(dòng)蛋白家族Member14蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Phospho-SirT1 (Ser27)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesu

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：SIK抑制劑(HG-9-91-01)

英文名稱：HG-9-91-01

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究,；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大小,；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小豆蔻明(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Jolkinolide B乙?；D(zhuǎn)移10抗體包裝1g

小茴香（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Liquidambaric lactone絲/蘇蛋白激Nek7抗體包裝25g

小薊（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Glycerine trioleate神經(jīng)正五聚體1抗體包裝5g

小秦艽（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Vinblastine煙酰核苷轉(zhuǎn)氫抗體包裝100g

小葉榕（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Vinblastine利鈉肽受體B抗體包裝25g

纈草三酯英文名稱： Anhydrovinblastine利鈉肽受體C抗體包裝100g

薤白（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Vincristine磷化谷受體2B抗體包裝25g

辛弗林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sparteine sulfate磷化谷受體2B抗體包裝100ml

辛弗林鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： LappaconitineNADPH氧化2抗體包裝25ml

辛辣內(nèi)酯A（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： LycopeneNADPH氧化活化蛋白1抗體包裝100g

辛夷（望春花）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Orcinol glucosid磷化核因子抗體包裝25g

辛夷脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Liriope muscari baily saponins C磷化核因子抗體包裝1g

新補(bǔ)骨脂異黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ardisiacrispin A磷化核因子抗體包裝5g

新橙皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Pectolinarigenin磷化核因子抗體包裝1g

新橙皮苷二氫查爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Polygalasaponin F神經(jīng)上皮轉(zhuǎn)化基因1抗體包裝25g

: =CCTCCAB209161=KACC14537資源名稱: 北極嗜冷居菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%金屬硫蛋白試劑盒醋戊曲酯 ;Acevaltrate

荷氏科爾韋爾氏菌Colwellia│hornerae 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于培養(yǎng)解整合樣金屬蛋白9試劑盒臭椿 ;Ailanthone

白假絲酵母Candida│albicans 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,，標(biāo)準(zhǔn)品解整合樣金屬蛋白8試劑盒草質(zhì);Herbacetin
SIK抑制劑(HG-9-91-01)腫瘤/抗原2抗體淀粉樣蛋白β1-40(Aβ1-40)檢測(cè)試劑盒Aβ1-40 ELISA Kit

腫瘤/抗原1B碘腺原脫碘Ⅲ(DIO3)檢測(cè)試劑盒DIO3 ELISA Kit

皮膚T淋巴瘤相關(guān)抗原5抗體（腦膜瘤表達(dá)抗原6）碘腺原脫碘Ⅱ(DIO2)檢測(cè)試劑盒DIO2 ELISA Kit

腫瘤/抗原3抗體抵抗(RETN)檢測(cè)試劑盒RETN ELISA Kit

腦多巴神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體低氧誘導(dǎo)因子2α(HIF2α)檢測(cè)試劑盒HIF2α ELISA Kit

鈣依賴分泌激活蛋白2/自閉癥的相關(guān)蛋白抗體低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF1α)檢測(cè)試劑盒HIF1α ELISA Kit

膽囊收縮A受體抗體低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP1)檢測(cè)試劑盒LRP1 ELISA Kit

小腦肽3抗體低密度脂蛋白受體銜接蛋白1(LDLRAP1)檢測(cè)試劑盒LDLRAP1 ELISA Kit

周期依賴性激樣5抗體低密度脂蛋白受體(LDLR)檢測(cè)試劑盒LDLR ELISA Kit 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物,。

3,、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí),，使MTT 還原為甲臜,。

6、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8,、結(jié)果分析

a,、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無(wú)細(xì)胞）,，各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值,，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)