NF-κB抑制劑((+)-DHMEQ)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-SIP1 /FITC 熒光素標記運動神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ABL1(v-abl Abelson murine leukemia viral oncogene homolog 1) ABL1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細胞,，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細胞,，胰酶消化時間不宜過長或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,，加入細胞培養(yǎng)液,，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細胞,。

3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細胞,，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細胞,，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標,，PI為縱坐標,。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光,，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細胞膜完整性的細胞,，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán),。

大腸埃希氏桿菌Geobacillus stearothermophilus豬纖溶原激活物抑制因子(PAI)

燼灰孢鏈霉菌Geobacillus stearothermophilus豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)

單胞菌屬Paenibacillus polymyxa豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)

嗜熱脂肪芽胞桿菌Paenibacillus macerans豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)

長柄大環(huán)柄菇Bacillus coagulans豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)

 絲狀支原體絲狀亞種Bacillus coagulans豬血小板衍生生長因子(PDGF)

根瘤菌Geobacillus stearothermophilus豬血小板衍生生長因子(PDGF)

潮濕學校擬諾氏菌Bacillus licheniformis豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)

釀酒酵母Paenibacillus macerans豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)

桔青霉Bacillus pumilus豬組織型纖溶原激活劑(t-PA)

裂擬迷孔菌Bacillus licheniformis豬組織型纖溶原激活劑(t-PA)

耐寒短桿菌Paenibacillus macerans豬組織因子(TF)

香菇Paenibacillus macerans豬組織因子(TF)

黃桿菌Paenibacillus macerans豬白介1受體拮抗劑(IL1Ra)

釀酒酵母Paenibacillus macerans豬白介1受體拮抗劑(IL1Ra)

大豆慢生根瘤菌Paenibacillus macerans豬高鐵血紅蛋白(MHB)

5-羥色胺受體1B抗體紫紅紅球菌（玫瑰紅紅球菌）滑液支原體

14-3-3蛋白/14-3-3α/β/γ/δ/ε亞型抗體類短短芽孢桿菌蠟樣芽胞桿菌

5-羥色胺受體1A抗體強壯類芽孢桿菌破傷風梭菌

14-3-3proteinζ/δ抗體麗短芽孢桿菌口蹄疫病毒（A型）
NF-κB抑制劑((+)-DHMEQ)SSB 英文名稱： 干燥癥SSB/La抗體 0.2ml

Ensconsin 英文名稱： 上皮細胞微管相關(guān)蛋白7抗體 0.2ml

CD25/白介素2受體a鏈抗體 Anti-CD25/IL-2RA 0.1ml

human Rabies virus IgG/Biotin 人狂犬病免疫球蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-GSK3 Beta (Tyr216) 磷酸化葡萄糖合成激酶3β抗體 規(guī)格 0.1ml

ICAM-2/CD102(intercellular adhesion molecules-2) 細胞間粘附分子-2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg