產(chǎn)品屬性:
中文名稱:雙重酪氨酸激酶抑制劑(NVP-TAE 226)
英文名稱:NVP-TAE 226
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
NVP-TAE226是一種雙重酪氨酸激酶抑制劑,,作用于FAK和IGF-IR,,IC50分別為5.5nM和0.14μM。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:761437-28-9 別名:TAE226 純度:98.98% 分子量:468.94 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究,;
②生物膜與細胞器的研究,;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控,;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大腸埃希菌PE-Cy3標記的兔抗猴IgMAnti-SKA2 Antibody核仁磷蛋白(NPM)
香魚假單胞菌PE-CY5標記的兔抗猴IgMAnti-SKP2 Antibody核仁蛋白9(NOL9)
玉米 轉(zhuǎn)基因玉米 MIR162 品系PE-Cy5.5標記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-SKP2 Antibody核仁蛋白8(NOL8)
Bacillus subtilis WB800 (枯草芽孢桿菌WB800)PE-Cy3標記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-SKP1 Antibody核仁蛋白7(NOL7)
芽孢桿菌屬PE-CY5標記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-SLBP Antibody核仁蛋白6(NOL6)
球孢白僵菌PE-Cy7標記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-SLC10A1 Antibody核仁蛋白58(NOP58)
柔嫩艾美耳球蟲Alexa Fluor 488標記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC10A1 Antibody(PB0788)核仁蛋白4(NOL4)
食菌屬Alexa Fluor 555標記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC10A1 Antibody核仁蛋白3(NOL3)
淡色生赤殼PE-Cy5.5標記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC12A1 Antibody核仁蛋白14(NOL14)
果蔬汁 死蜱,、菊酯、多效唑,、 噠螨靈PE-Cy7標記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC11A1 Antibody核仁蛋白12(NOL12)
針孢鏈霉菌PE-Cy5.5標記的兔抗小鼠IgMAnti-SLC12A1 Antibody(PB0436)核仁蛋白11(NOL11)
枯草芽孢桿菌PE-Cy7標記的兔抗小鼠IgMAnti-SLC12A3 Antibody核仁蛋白10(NOL10)
菜豆擬莖點霉PE標記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC14A1/UTE Antibody核仁蛋白1(NOL1)
腸桿菌屬PE-Cy3標記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC12A6 Antibody核膜蛋白(NRM)
工業(yè)堿速測包(用于水發(fā)產(chǎn)品)PE-CY5標記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC12A2 Antibody核連蛋白2(NUCB2)
立枯絲核菌APC標記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC12A5 Antibody核連蛋白1(NUCB1)
黑色瘤硫軟骨蛋白多糖4抗體羅倫氏隱球酵母大鼠血管內(nèi)皮細胞提取物
NDST1蛋白抗體惡臭醋桿菌大鼠心肌成纖維細胞提取物
神經(jīng)元1抗體金黃色葡萄球菌金黃色亞種大鼠腸靜脈內(nèi)皮細胞提取物胞
指趾關(guān)節(jié)粘連NOG蛋白抗體阿舒假囊酵母大鼠食管平滑肌細胞提取物
雙重酪氨酸激酶抑制劑(NVP-TAE 226)海膽鞘氨單胞 二苯鹽酸鹽
稻生擲孢酵母 6-甲氧基-7-異戊烯氧基
楷米干酪 青蒿琥酯
疣梗青霉 夫西地酸
枯草芽孢桿 槐黃烷酮C
淡紫紫霉 2,6-二甲氧基-4-乙基
大腸埃希氏○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○74 當歸多糖
釀酒酵母 4-基-2,6-二甲氧基
枯草芽孢桿 己唑
栗酒裂殖酵母 (±)-松屬
大栓孔 異原莪述烯
產(chǎn)氣莢膜梭 C型 二苯甲
叢毛紅曲 安賽蜜
酵母 郁金二酮
地衣芽孢桿 4-羥基苯甲酰肼
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)