產(chǎn)品屬性:
中文名稱:RGS抑制劑(CCG-63802)
英文名稱:CCG-63802
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
CCG-63802是可逆的G蛋白信號調(diào)節(jié)子(RGS)抑制劑,,對RGS4抑制性尤其高,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:620112-78-9 純度:95.0% 分子量:450.51 儲存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小孢根霉少孢變種Pseudomonas stutzeri
出芽短梗霉(黑酵母)Pseudomonas salomonii
平菇Pseudomonas stutzeri
類芽胞桿菌Pseudomonas thivervalensis
釀酒酵母Pseudomonas trivialis
熒光假單胞菌Pseudomonas tuomuerensis
費(fèi)希爾曲霉Pseudomonas tuomuerensis
Pectobacterium wasabiaePseudomonas umsongensis
球毛殼Pseudomonas vancouverensis
節(jié)桿菌屬Pseudomonas veronii
豬輪狀?。捎嗁彛?/span>Pseudomonas xanthomarina
矩圓黑盤孢Pseudomonas xanthomarina
橄欖色盾殼霉Pseudomonas xiamenensis
大腸埃希菌Pseudoruegeria aquimaris
橘色硬皮馬勃Pseudoruegeria aquimaris
栗疫菌Pseudoxanthomonas taiwanensis
小鼠因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)免疫試劑盒磷化鐵蛋白Fe65抗體人角蛋白21-1片段(CYFRA21-1) 黑介子苷
小鼠因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)免疫試劑盒磷化鐵蛋白Fe65抗體人角蛋白21-1片段(CYFRA21-1) 黑芥子硫苷一水
小鼠外信號調(diào)節(jié)激(ERK)免疫試劑盒磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT) 紅花八角
小鼠色C(Cyt-C)免疫試劑盒磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT) 紅景天苷
RGS抑制劑(CCG-63802)Somatostatin Receptor 5 英文名稱: 生長抑素受體5抗體 0.1ml
phospho-MEK1 (Thr292) 英文名稱: 磷酸化原活化蛋白激酶1抗體 0.1ml
CD33抗體(人) Anti-CD33 0.1ml
Anti-VEGF/FITC 熒光素標(biāo)記VEGF抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GSK3 Alpha(Ser21) 磷酸化葡萄糖合成激酶-3α抗體 規(guī)格 0.1ml
E-Selectin E選擇素抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)