詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:c-Met抑制劑(PHA-665752)
英文名稱:PHA-665752
產品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
PHA-665752是ATP競爭性c-Met選擇性抑制劑,,IC50為9nM,,比對RTKs和STKs的抑制性高50倍,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:477575-56-7 純度:96.50% 分子量:641.61 儲存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用,。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究,;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控,;
⑤細胞分化及其調控,;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化,;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
鞘單胞菌屬干擾epsilon 1蛋白抗體Human RMND5B ELISA KitStilbene(二乙烯)免疫試劑盒
葡萄座腔菌磷化KB抑制蛋白激γ抗體Human RNASE11 ELISA KitStanozolol(康力龍)免疫試劑盒
蘇云金芽胞桿菌庫爾斯塔克亞種磷化白介1受體1抗體Human RNASEH1 ELISA KitRat Ficolin-2(FCN2)免疫試劑盒
Marivirga tractuosa白介3抗體Human PDIA4(Protein disulfide-isomerase A4) ELISA KitRactopamine(萊克多巴)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌異戊烯焦磷1抗體Human RNASE13 ELISA KitQuinolones(喹諾類)免疫試劑盒
食樹脂新鞘菌磷化胰島受體底物-1抗體Human RNASEH2A ELISA KitPig Ficolin-2(FCN2)免疫試劑盒
光孢黃叢枝珊瑚菌磷化胰島受體底物-1抗體Human RIPK1(Receptor interacting serine/threonine kinase 1) ELISA KitPhenylbutazone(保泰松)免疫試劑盒
約利曼漆斑菌胰島誘導基因1抗體Human RIC8A ELISA KitMouse Ficolin-2(FCN2)免疫試劑盒
金黃色葡萄球菌金黃亞種FC段γ受體3/免疫球蛋白G Fc段受體III抗體Human RIC8B ELISA KitHuman Heat shock protein beta-6(HSPB6)免疫試劑盒
Pseudarthrobacter磷化白介-1受體相關激4抗體Human RIMKLB ELISA KitHuman cleaved microtubule-associated protein tau(C-MAPT/C-TAU)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌IQCF1蛋白抗體Human RIMS3 ELISA KitCorticosteroid(地塞米松)免疫試劑盒
副球菌屬IQCJ蛋白抗體Human RHPN1 ELISA KitClenbuterol(克倫特羅)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌抑制結合蛋白抗體Human RHPN2 ELISA KitChloramphenicol(霉)免疫試劑盒
慢生根瘤菌免疫球蛋白超家族成員3抗體Human APOA1BP(Apolipoprotein A-I-binding protein) ELISA KitBovine Ficolin-2(FCN2)免疫試劑盒
杏鮑菇(13 )免疫球蛋白超家族成員6抗體Human RIBC2 ELISA KitBoldenone(寶丹)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌免疫球蛋白超家族成員9抗體Human RIMS3 ELISA KitBeta Lactams(β-內酰)免疫試劑盒
結核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質量規(guī)格:>98.0%(T)白術內酯III
挪威假絲酵母Candida│norvegensis 質量規(guī)格:>75.0%(GC)白術內酯Ⅱ
嗜熱鏈球菌Streptococcus│thermephilus 質量規(guī)格:>92.0%(GC)白術內酯Ⅰ
c-Met抑制劑(PHA-665752)膠孢 三對甲苯基膦內皮1Elisa
糞腸球 3-氨基吡咯烷內皮型一氧化氮合Elisa
Pseudoduganella 8-羥基喹啉銅內源性糖皮質Elisa
鴨沙門氏 8-羥基喹啉銅鳥氨酸氨甲?;D移Elisa
球形芽孢桿 磺二甲氧嘧啶鈉鹽鳥氨酸脫羧Elisa
偶發(fā)分枝桿偶發(fā)亞種 磺二甲氧嘧啶鈉鹽鳥氨酸轉氨Elisa
繡色土生單胞 (±)-樟腦醌尿囊Elisa
大腸埃希 甲酰苯尿氮Elisa
聚多曲霉 N-芐檸檬酸合Elisa
雜色曲霉 (2-溴乙基)苯皮質Elisa
火紅色紅曲霉 二芐皮質酮;腎上腺酮Elisa
黑根霉 (溴甲基)三苯基溴化鏻葡萄糖-6-磷酸脫氫Elisa
清酒酵母 肉桂酸芐酯前列腺E2Elisa
香菇 對甲苯二硫羥賴氨酸吡啶啉Elisa
枯草芽孢桿 2-氨基-6-嘌呤羥脯氨酸Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)