產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Aurora-A激酶抑制劑(MK-5108)
英文名稱:MK-5108
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
MK-5108是高效和特異性的Aurora-A激酶抑制劑,,IC50值為0.064nM,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1010085-13-8 別名:VX-689 純度:98.0% 分子量:461.94 儲存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究,;
③細胞骨架體系的研究,;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控,;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
侵蝕侏儒囊菌環(huán)指蛋白94抗體Anti-IL15RA Antibody糖基化依賴性黏附分子(GlyCAM1)
釀酒酵母血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體Anti-IL16 Antibody糖基化磷脂酰肌特異性磷脂D1(GPLD1)
地衣芽孢桿菌腺泡狀軟組織肉瘤結(jié)構(gòu)域蛋白ASPC抗體Anti-IL17A Antibody糖磺基轉(zhuǎn)移9(CHST9)
枯草芽孢桿菌G蛋白偶聯(lián)誘導蛋白2受體抗體Anti-IL16 Antibody(PB0250)糖磺基轉(zhuǎn)移8(CHST8)
蜂房類芽孢桿菌腫瘤壞死因子C/淋巴β抗體Anti-IL17A Antibody糖磺基轉(zhuǎn)移7(CHST7)
紅法夫酵母甲狀腺受體相互作用蛋白1抗體Anti-IL17B Antibody糖磺基轉(zhuǎn)移6(CHST6)
Citricoccus轉(zhuǎn)化生長因子β1/TGF β1/TGF-β1抗體Anti-IL17B Antibody糖磺基轉(zhuǎn)移5(CHST5)
根瘤菌屬腫瘤相關抗原L6抗體Anti-IL17C Antibody糖磺基轉(zhuǎn)移4(CHST4)
沙針擬盤多毛孢跨膜蛋白59抗體Anti-IL17C Antibody糖磺基轉(zhuǎn)移3(CHST3)
傘菌假單胞菌神經(jīng)元蛋白22抗體Anti-IL17F Antibody糖磺基轉(zhuǎn)移2(CHST2)
釀酒酵母味覺受體蛋白家族2亞基60抗體Anti-IL17F Antibody糖磺基轉(zhuǎn)移15(CHST15)
枯草芽孢桿菌枯草亞種骨架結(jié)合蛋白2抗體Anti-IL17F Antibody糖磺基轉(zhuǎn)移14(CHST14)
炭黑曲霉TUB蛋白抗體Anti-IL17RA Antibody糖磺基轉(zhuǎn)移13(CHST13)
馬爾他布魯氏菌轉(zhuǎn)錄因子Tbx5抗體Anti-IL18 Antibody糖磺基轉(zhuǎn)移12(CHST12)
大腸埃希氏桿菌跨膜蛋白9家族成員4抗體Anti-IL18 Antibody糖磺基轉(zhuǎn)移11(CHST11)
傘形卷霉共濟失調(diào)毛細血管擴張癥D相關蛋白抗體Anti-IL18 Antibody糖磺基轉(zhuǎn)移10(CHST10)
小谷酰胺三角四肽重復區(qū)蛋白α抗體嗜熱乳鏈球菌小鼠前列腺上皮細胞
SUGT1蛋白抗體蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草)小鼠膀胱成纖維細胞
紡錘體和著絲粒相關蛋白3抗體鰻弧菌成年小鼠心肌細胞
紡錘體和著絲粒相關蛋白2抗體溫和氣單胞菌小鼠直腸上皮細胞
Aurora-A激酶抑制劑(MK-5108)平臍蠕孢 鋁,、鉍,、鈷、鎂、釩/Al, Bi, Co, Mg, V酮體Elisa
鞘氨單胞 2-氨基-4-苯硫酚凝血因子VElisa
鋁,、鉍,、鈷、鎂,、釩/Al, Bi, Co, Mg, V半胱氨酸蛋白-8Elisa
豌豆根瘤 2-溴-4-氟苯CD83Elisa
類銀白紫絲膜 2-溴噻吩干擾調(diào)節(jié)因子7Elisa
竹針孢座囊 2,5-吡啶二羧酸干擾-λ3Elisa
鈍齒棒桿 鋁,、銅、鐵,、錳,、鋅/Al, Cu, Fe, Mn, Zn谷氨酸Elisa
Hymenobacter mucosus 鋁、鈹,、鉻,、銻、錫/Al, Be, Cr, Sb, Sn受體酪氨酸激AXLElisa
肉色栓 二化鉑維生D25羥化Elisa
大腸埃希 銀,、汞,、鉬、鈉,、硒/Ag, Hg, Mo, Na, Se色P450家庭成員27A1Elisa
星形擬盤多毛孢 (S)-3-吡咯烷色P45027B1Elisa
米曲霉 鈰,、鈷、鋰,、鈧,、、釔 /Ce, Co, Li, Sc, Tl, Y色P4502J2Elisa
金產(chǎn)色鏈霉 N-乙酰乙二1,25-二羥維生D(3)24-羥化,,線粒體Elisa
根瘤 鈷,、鍺、銦,、鋰,、、釔 /Co, Ge, In, Li, Tl, Y偽狂犬病GB抗原Elisa
淡紫擬青霉 鈰,、鈷,、鋰、鈧,、,、釔/Ce, Co, Li, Sc, Tl, Y偽狂犬病GE抗原Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)