商品介紹:
CHZ868是類型II的JAK2抑制劑,,抑制EPOR JAK2WT Ba/F3cell細(xì)胞的IC50值為0.17μM。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1895895-38-1 純度:98.33% 分子量:423.42 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:JAK2抑制劑(CHZ868)
英文名稱:CHZ868
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
禾谷鐮刀菌ras癌基因家族Rab3A--Rab3D抗體Anti-DDR2 Antibody早期生長應(yīng)答因子3(EGR3)
根瘤菌鳥嘌呤核苷交換因子rasgef1a抗體Anti-DDT Antibody早期生長應(yīng)答因子2(EGR2)
樺褶孔菌胰腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白RLLM1抗體Anti-DDT Antibody早期生長應(yīng)答因子1(EGR1)
枯草芽孢桿菌環(huán)指蛋白45/自分泌運動因子受體抗體Anti-DDX4 Antibody早期內(nèi)體抗原1(EEA1)
相鄰小孔菌維甲相關(guān)孤兒受體α抗體Anti-DDX3X Antibody早期B-因子2(EBF2)
釀酒酵母維甲相關(guān)孤兒受體γ抗體Anti-DDX1 Antibody早期B-因子1(EBF1)
孔狀短小莖點霉癌基因RAS相關(guān)蛋白Rab4A抗體Anti-DDX4 Antibody早老2(PS2)
香菇ATP調(diào)節(jié)離子通道ROM K抗體Anti-DDX4 Antibody早老1(PSEN1)
黑青霉ras基因相關(guān)蛋白Rab24抗體Anti-DDX5 Antibody再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ)
固氮野野村氏菌視黃脫氫10抗體Anti-DDX5 Antibody再生胰島衍生蛋白3α(REG3α)
異型薄孔菌Ras蛋白腦組織同源類似物RHEB蛋白抗體Anti-DDX6 Antibody再生胰島衍生蛋白1β(REG1β)
桔橙小單孢菌原癌基因相關(guān)蛋白RAP2B抗體Anti-DDX5 Antibody再生蛋白1(NEO1)
禾谷鐮刀菌視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白5抗體Anti-DEFB1 Antibody載脂蛋白O(APOO)
釀酒酵母Rho相關(guān)蛋白激2抗體Anti-DDX58 Antibody載脂蛋白M(APOM)
盤長孢狀盤孢核糖核苷還原亞基R2抗體Anti-DEFA1 Antibody載脂蛋白L6(APOL6)
硝鹽還原海桿菌Runx3抗體Anti-DELE1 Antibody載脂蛋白L5(APOL5)
: 46(1960)資源名稱: 傷寒沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IFO0206資源名稱: 釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格:BR,>98%,油狀
木霉Trichoderma│piluliferum J. Webster & Rifai 質(zhì)量規(guī)格:0.98
JAK2抑制劑(CHZ868)鹽古桿 厭氧瓊脂乙酰CoA羧化Elisa
側(cè)耳 梭鑒別瓊脂(DCA)異檸檬酸脫氫Elisa
耐寒短桿 強化梭鑒別瓊脂(DRCA)硬脂酰去飽和1Elisa
紫色紅曲 強化梭瓊脂游離血紅蛋白Elisa
短乳桿 3-氨基吡-2-甲酸甲酯游離脂肪酸Elisa
乳酒假絲酵母 強化梭培養(yǎng)基(RCM)魚精蛋白Elisa
鹽沼鹽桿 TSN瓊脂孕酮Elisa
同合小克銀漢霉 2-甲氧基吡啶粘蛋白2Elisa
運動節(jié)桿 2-乙基磺酰脂蛋白磷脂A2Elisa
豇豆慢生根瘤 2-吡啶乙酸鹽酸鹽脂蛋白脂Elisa
花楸盤多毛孢 11-溴-1-十一脂多糖;內(nèi)Elisa
靈芝(紅芝,,赤芝) 4-肉桂酸脂肪Elisa
隆氏針層孔 二甲酚橙二鈉鹽脂肪酸合成Elisa
釀酒酵母 亞硫酸鐵瓊脂中性粒彈性蛋白Elisa
腸沙門氏腸亞種邁阿密血清型 TBB培養(yǎng)基腫瘤壞死因子αElisa