產(chǎn)品屬性:
中文名稱:3β-羥化類固醇脫氫酶抑制劑(Trilostane)
英文名稱:Trilostane
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Trilostane(Win24540;Modrastane)是3β-羥化類固醇脫氫酶抑制劑,,可作用于庫(kù)興氏綜合征,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):13647-35-3 別名:Win 24540 純度:99.76% 分子量:329.43 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
普魯雜質(zhì)A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pantoprazole Sodium無胸腺癥相關(guān)蛋白DGCR6/迪格奧爾格綜合征關(guān)鍵基因6抗體包裝5g
鹽羅格列雜質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fasudil hydrochloride朊蛋白DPL抗體包裝100mg
鹽羅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fasudil hydrochloride肌強(qiáng)直性營(yíng)養(yǎng)不良蛋白激抗體包裝1g
鹽羅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rhodionin有絲分裂控制蛋白dis3抗體包裝1g
鹽羅右旋體(鹽羅雜質(zhì)B)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rhodiosin肝癌新基因3蛋白抗體包裝5g
鹽羅通定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dideoxyinosine;DidanosineDapper2蛋白抗體包裝25g
鹽洛美沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Icariin I; Icariside IDapper3蛋白抗體包裝5g
鹽馬尼地平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Baohuoside II背神經(jīng)管核蛋白抗體包裝1g
鹽馬普替林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sophoricoside雙基精解1抗體包裝25g
鹽嗎啉胍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sophoricoside絲/蘇蛋白激DCAMKL1抗體包裝5g
鹽美金剛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methylophiopogonanone A 唐氏綜合征粘附分子抗體包裝25g
鹽美利曲辛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methylophiopogonanone B磷脂磷HTPAP抗體包裝5g
鹽美司坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 7,2-Dihydroxy-3,4-Dimethoxyisoflavan穿膜蛋白DLK1抗體(C端)包裝25g
鹽美西律(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3-Hydroxy-9,10-Dimethoxypterocarpan二氫葉還原樣1抗體包裝5g
鹽咪達(dá)普利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oroxyloside脫氧尿苷三磷DUT抗體包裝1g
: 3alvar.2B.3339資源名稱: 乙型副傷寒沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品同型半胱試劑盒松脂二葡萄糖苷;Pinoresinol
繩索狀芽孢桿菌Bacillus│funiculus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR鐵-過氧化物岐化試劑盒棗仁皂苷B;Jujuboside B
黏著海桿菌Marinobacter│adhaerens 質(zhì)量規(guī)格:>99%以上,S-構(gòu)型無結(jié)晶鐵調(diào)25試劑盒棗仁皂苷A;Jujuboside A
3β-羥化類固醇脫氫酶抑制劑(Trilostane)小鼠血管活性腸肽五味子(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
大鼠內(nèi)五味子Human, Mouse, Rat
大鼠過氧化物體增殖因子活化受體γ五味子烯(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
小鼠狀腺過氧化物五味子乙(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人癌胚鐵蛋白五味子酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
小鼠αL巖藻糖苷五味子酯戊Human, Mouse, Rat
大鼠環(huán)孢A五味子酯乙(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
人鱗狀癌相關(guān)抗原五脂A1Human, Mouse, Rat
大鼠超敏C反應(yīng)蛋白五指柑(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Rat
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)