商品介紹:
MG-101是一種有效的半胱氨酸蛋白酶抑制劑,作用于鈣蛋白酶I,鈣蛋白酶II,組織蛋白酶B,和組織蛋白酶L,Ki值分別為190nM,220nM,150nM,500pM. 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:110044-82-1 別名:Calpain inhibitor I;ALL 純度:95.0% 分子量:383.53 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:半胱氨酸蛋白酶抑制劑(MG-101)
英文名稱:MG-101
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
解淀粉芽孢桿菌新型核蛋白質(zhì)1抗體Human PDGF-BB(Plaet Derived Growth Factor-BB) ELISA Kit黃體生成釋放激(LHRH)
Sinibacillus核仁蛋白3抗體Human PON1(Serum paraoxonase/arylesterase 1) ELISA Kit黃體生成(LH)
絲膜菌屬核孔蛋白1抗體Human PON1(Serum paraoxonase/arylesterase 1) ELISA Kit氧化(XOD)
黑附球菌NADPH氧化4抗體Human PRL(Prolactin) ELISA Kit環(huán)磷腺苷(cAMP)
暗孢節(jié)菱孢菌脂肪分化因子24Human NGF/NGFβ(Beta-nerve growth factor) ELISA Kit環(huán)磷酰(CTX)
豚鼠氣單胞菌肌動蛋白結(jié)合蛋白Z盤狀蛋白抗體Human PTX3(Pentraxin 3) ELISA Kit環(huán)磷腺苷(cAMP)
谷棒桿菌活化T核因子5蛋白抗體Human PRSS8(Prostasin) ELISA Kit環(huán)磷鳥苷(cGMP)
球形賴芽孢桿菌磷化活化T核因子5蛋白抗體Human NID-1(Nidogen-1/Entactin) ELISA Kit環(huán)加氧2(COX-2)
平滑假絲酵母脂質(zhì)運(yùn)載蛋白抗體Human MFGE8(Lactadherin) ELISA Kit環(huán)孢A(CsA)
波蘭青霉2型神經(jīng)纖維瘤抗體Human NT-3(Neurotrophin-3) ELISA Kit踝蛋白(talin)
緩慢葡萄球菌膜相關(guān)磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Human NT-4(Neurotrophin-4) ELISA Kit花生四烯5脂氧合(ALOX5/LOG5)
釀酒酵母納曲抗體IgGHuman MMP13(Matrix Metalloproteinase 13) ELISA Kit花生四烯5脂加氧(ALOX-5)
植物乳桿菌磷化分化相關(guān)基因NDRG1抗體Human MIA(Melanoma Inhibitory Activity Protein 1) ELISA Kit花生四烯15脂加氧(ALOX15/LOG15)
赤曲霉磷化分化相關(guān)基因NDRG1抗體Human MMP-3(Matrix Metalloproteinase 3) ELISA Kit花生四烯(AA)
黑烏霉泛連接NEDD4-2抗體Human MMP-7(Matrix Metalloproteinase 7) ELISA Kit琥珀酰合成(SCS)
煙色毛霉磷化2型神經(jīng)纖維瘤抗體Human MMP-8(Matrix Metalloproteinase 8) ELISA Kit紅原卟啉(EP)
灰葡萄孢Botrytis│cinerea 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR楊梅
哈維弧菌Vibrio│harveyi 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR蘆薈大黃
苜蓿中華根瘤菌Sinorhizobium│meliloti 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR大黃酚
半胱氨酸蛋白酶抑制劑(MG-101)韋斯特迪克氏曲霉 RV肉湯雌二Elisa
腐爛粘束梗霉 瓊脂培養(yǎng)基N(溴化十六烷基三瓊脂)黃體生成Elisa
樟疫霉 溴化十六烷基三瓊脂孕酮Elisa
球孢白僵 檢定培養(yǎng)基1號(高PH)促卵泡Elisa
產(chǎn)氨短桿 D-阿洛糖雌二Elisa
弓形蟲(RH株) 支原體瓊脂培養(yǎng)基睪酮Elisa
新城疫病 麥康凱肉湯催乳Elisa
長柄條孢牛肝 BBL液體培養(yǎng)基乳糖Elisa
黑曲霉 GN增液顆粒糜蛋白Elisa
大腸埃希氏 1-甲酰胰蛋白Elisa
香菇 蛋白胨緩沖液顆粒酪蛋白αs1Elisa
木耳屬 MLCB寒天培地顆粒酪蛋白βElisa
丁香假單胞 瓊脂培養(yǎng)基F(紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂)κ酪蛋白Elisa
構(gòu)巢曲霉 腸道富集肉湯培養(yǎng)基(USP)雌Elisa
靈芝屬 (S)-(+)-1-苯基-1,2-乙二促腎上腺皮質(zhì)Elisa