P糖蛋白抑制劑(Tariquidar)公司正在出售的產(chǎn)品：OJ/IleRS(Human OJ-antibody) ELISA Kit 人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成抗體對苯磺酰 CP，97%
ACA/CENP(Human Anticentromere Antibody) ELISA Kit 人抗著絲點(diǎn)抗體對苯磺酰 AR,，99%
MYOG(Human myogenin) ELISA Kit

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細(xì)胞,，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,，加入細(xì)胞培養(yǎng)液,，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞,，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán)。

松口蘑衰老標(biāo)記蛋白30抗體Anti-Cytochrome P450 1A2/Cyp1a2 Antibody著絲粒蛋白E(CENPE)

枯草芽胞桿菌環(huán)指蛋白56Anti-DAPK1 Antibody著絲粒蛋白B(CENPB)

膜醭畢赤酵母受體活性修飾蛋白1抗體Anti-CYP7A1 Antibody著絲粒蛋白36(CENP36)

黑乳菇胞內(nèi)接頭蛋白P14抗體Anti-Cyt 19/As3mt Antibody著絲粒蛋白32(CENP32)

約氏不動桿菌RNA結(jié)合蛋白X-連鎖蛋白2抗體Anti-DAPK2 Antibody蔗糖異麥芽糖(SI)

產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型視網(wǎng)膜母瘤相關(guān)蛋白p130抗體Anti-DAXX Antibody遮蔽蛋白(OBSCN)

折疊馬賽菌磷化A-Raf抗體Anti-DAXX Antibody張力蛋白3(TNS3)

大腸埃希氏菌環(huán)指蛋白10抗體Anti-DAXX Antibody張力蛋白2(TNS2)

藍(lán)色犁頭霉RAN結(jié)合蛋白2/核孔蛋白抗體Anti-DARS2 Antibody張力蛋白1(TNS1)

聚貪噬菌環(huán)指蛋白11抗體Anti-DAZAP1 Antibody粘脂蛋白3(MCOLN3)

蘇云金芽孢桿菌性核糖體磷蛋白P2抗體Anti-DBI Antibody粘脂蛋白2(MCOLN2)

彈性馬鞍菌腫瘤相關(guān)表面抗原RCAS1抗體Anti-DBF4 Antibody粘脂蛋白1(MCOLN1)

植物乳桿菌植物亞種心肌蘭尼堿受體抗體（腦肌蘭尼堿受體）Anti-DAZL Antibody粘著斑激(FAK)

松鼠葡萄球菌松鼠亞種RASSF5抗體Anti-DBP Antibody粘膜關(guān)聯(lián)上皮趨化因子(MEC)

蒼白桿菌環(huán)指蛋白93抗體Anti-DBH Antibody粘蛋白7(MUC7)

喜熱單胞菌屬環(huán)指蛋白111抗體Anti-DCC Antibody粘蛋白6(MUC6)

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：>90%(T),BR

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：0.98

唐菖蒲伯克霍爾德氏菌Burkholderia│gladioli 質(zhì)量規(guī)格：BR
P糖蛋白抑制劑(Tariquidar)海水球 艾格瓊脂瘟病IgA抗體Elisa

孢籃狀 TM培養(yǎng)基瘟病IgG抗體Elisa

白黃阮繼生氏 DL-泛瘟病IgM抗體Elisa

彎孢 2-環(huán)己酮甲酸乙酯瘟抗體Elisa

異常威克漢姆酵母 假單胞分離肉湯間粘附分子1Elisa

糙卷霉 肌測定培養(yǎng)基纖連蛋白Elisa

類食品乳桿 酸性肉湯性結(jié)合球蛋白Elisa

魯毛霉 煙酸測定培養(yǎng)基雄烯二酮Elisa

淺黃曲霉 維生B12測定用培養(yǎng)基雄烯酮Elisa

香菇 測定培養(yǎng)基血管緊張1-7Elisa

豇豆慢生根瘤 泛酸測定培養(yǎng)基血管緊張??Elisa

薛瓦酵母 游離生物測定培養(yǎng)基血管內(nèi)皮生長因子Elisa

大腸埃希 2-酸血管內(nèi)皮粘附分子1Elisa

卵孢木霉 二環(huán)己基化膦血管生成1Elisa

紅緣層孔 氣單胞培養(yǎng)基基礎(chǔ)血管生成2Elisa