產(chǎn)品屬性:
中文名稱:MELK抑制劑
英文名稱:OTSSP167 hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
OTSSP167hydrochloride是一種高效的MELK抑制劑,,IC50值為0.41nM。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1431698-10-0 別名:MELK inhibitor 純度:99.80% 分子量:523.88 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究,;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究,;
④細胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細胞的起源與進化,;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
強雄腐霉SH2結(jié)構(gòu)域蛋白3A抗體Human TPO(Thrombopoietin) ELISA Kit肌紅蛋白(MYO/MB)
假蜜環(huán)菌轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體Human LH(Luteinizing Hormone) ELISA Kit肌紅蛋白(MB)
血紅鞘鞍單胞菌NPIP樣蛋白1抗體Human TSH(Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit肌酐(Cr)
黑曲霉老年性癡呆蛋白APH2抗體Human Surv(Survivin) ELISA Kit肌鈣蛋白T(Tn-T)
乳粉 三聚神經(jīng)凋亡調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)化蛋白1抗體(前蛋白轉(zhuǎn)化枯草溶菌9)Human CLEC3B(Tetranectin) ELISA Kit肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)
根瘤菌G蛋白偶聯(lián)受體147抗體Human SDC1(Syndecan-1) ELISA Kit肌鈣蛋白Ⅰ(cTnⅠ)
土味鏈霉菌孤兒核受體蛋白Nur77抗體Human TFF1(Trefoil factor 1) ELISA Kit饑餓激(GHRL)
微小桿菌磷化孤兒核受體蛋白Nur77抗體Human TFF2(Trefoil factor 2) ELISA Kit活性氧(ROS)
構(gòu)巢曲霉核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1Human TFF3(Trefoil factor 3) ELISA Kit活化受體樣激1(ALK1)
釀酒酵母谷受體2C抗體Human TGFα(Transforming Growth Factor α) ELISA Kit活化A(ACV-A)
聚生殼菌酪激B抗體Human REN(Renin) ELISA Kit活化凝血因子X(FXa)
雜色曲霉NADPH氧化4抗體Human TFPI(Tissue factor pathway inhibitor) ELISA Kit活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)
無核分布基因E同源蛋白1抗體Human PD-1/PDCD1(Programmed Cell Death Protein 1) ELISA Kit活化蛋白C抵抗(APCR)
大腸埃希氏桿菌絲/蘇蛋白激NEK9抗體Human POSTN/OSF2(Periostin) ELISA Kit活化蛋白C(APC)
釀酒酵母磷化絲/蘇蛋白激NEK9抗體Human PRL(Prolactin) ELISA Kit混合系列蛋白激樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)
黑白輪枝孢多調(diào)控因子1抗體Human PRSS8(Prostasin) ELISA Kit混合淋巴反應(yīng)封閉因子(MLR-Bf)
極單胞菌Polaromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR白藜蘆
: GIM3.220資源名稱: 華根霉 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR阿魏
茯苓Poria│cocos 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品二氫楊梅
MELK抑制劑魯氏接合酵母 脫氧膽鹽檸檬酸鹽瓊脂培養(yǎng)基白介8Elisa
酮叢毛單胞 沙氏葡萄糖瓊脂(含霉)白介23Elisa
總狀共頭霉 瓊脂培養(yǎng)基B乙型肝炎病表面抗原Elisa
釀酒酵母 YEP培養(yǎng)基乙型肝炎E抗原Elisa
葡萄盤孢 Slanetz和Bartley培養(yǎng)基甲狀旁腺Elisa
淡紫擬青霉 NAC瓊脂培養(yǎng)基降鈣Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 NAC液體培養(yǎng)基25羥基維生DElisa
曲霉 SPYE肉湯骨特異性堿性磷酸Elisa
葡萄汁有孢漢遜酵母 FS培養(yǎng)基球蛋白AElisa
釀酒酵母 梭強化培養(yǎng)基球蛋白GElisa
栗疫 酸化MRS瓊脂(AMRSA)球蛋白MElisa
鏈球(不定種) 酸化MRS瓊脂(AMRSA)褪黑Elisa
華麗黃鏈霉 瓊脂培養(yǎng)基K(XLD瓊脂)皮質(zhì)Elisa
枯草芽孢桿 乳糖肉湯培養(yǎng)基睪酮Elisa
褐革 α-D-(+)-塔羅糖孕酮Elisa
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細胞100μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)