5α還原酶同工酶抑制劑（Dutasteride）公司*的產(chǎn)品：Anti-PKA/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-Mink IgG 兔抗水貂IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
HA tag標(biāo)簽抗體 anti-HA tag 0.1ml
Dog IgM

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：5α還原酶同工酶抑制劑（Dutasteride）

英文名稱：Dutasteride

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究,；

③細(xì)胞骨架體系的研究,；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實驗報告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大小,；

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二,、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

操作規(guī)程

1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2,、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3,、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時,，使MTT 還原為甲臜。

6,、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻,。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8,、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

金針菇（毛柄金錢菌,、冬菇）Pseudomonas sp.

薛瓦酵母Pseudomonas sp.

硬毛擬革蓋菌Pseudomonas aeruginosa

炭疽芽胞桿菌Ralstonia pickettii

莖點(diǎn)殼屬Ralstonia sp.

土生假絲酵母Pseudomonas sp.

層出鐮刀菌Pseudomonas pseudoalcaligenes

金龜子綠僵菌Burkholderia gladioli

谷棒桿菌 Pseudomonas agarici

pAAV-RC-9Pseudomonas corrugata

云南紅球菌Burkholderia gladioli

運(yùn)動節(jié)桿菌Pseudomonas agarici

松口蘑Alcaligenes faecalis subsp. faecalis

珞珈山科恩氏菌Vibrio natriegens

膠韌革菌(榆耳，榆蘑)Enterobacter sp.

鐮刀菌屬Vibrio natriegens

Hyalodendron lignicolaHyalodendron│lignicola 質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定

瑞氏假絲酵母Candida│reukaufii 質(zhì)量規(guī)格：含量測定

馬腺疫鏈球菌獸疫亞種Streptococcus│equi subsp.zooepidemicus 質(zhì)量規(guī)格：含量測定
5α還原酶同工酶抑制劑（Dutasteride）Phospho-Smad3 (Ser208) 英文名稱： 磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 0.1ml

Phospho-Ezrin (Tyr353) 英文名稱： 磷酸化埃茲蛋白抗體 0.1ml

三葉肽因子3抗體 Anti-TFF3 0.1ml

Anti-TLR2/CD282 /FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-LEF1(Ser42) 磷酸化淋巴增強(qiáng)因子-1抗體 規(guī)格 0.1ml

phospha-Bcl-xL (pSer62) peptide (human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse) 磷酸化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg