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詳細介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究,；
③細胞骨架體系的研究,；
④細胞增殖及其調(diào)控；
⑤細胞分化及其調(diào)控,；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：細胞增殖與毒性檢測試劑盒（CCK-8）
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：100次/500次/3000次/10000次
發(fā)貨周期：1～3天
商品介紹：
產(chǎn)品原理： Cell Counting Kit（細胞增殖與毒性檢測試劑盒）是一種基于WST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒,，其性能優(yōu)于目前市面上進口的CCK-8試劑盒,。 WST-8是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑1-Methoxy PMS存在的情況下,，可以被還原生成橙黃色水溶性的甲臜（Formazan）,。細胞增殖越多越快，則顏色越深,；細胞毒性越大,，則顏色越淺。對于同樣的細胞,，顏色的深淺和細胞數(shù)目呈線性關(guān)系,。 產(chǎn)品優(yōu)勢： 可用于細胞因子誘導的細胞增殖檢測、抗癌藥物等對細胞有毒試劑誘導的細胞毒性檢測,、一些藥物誘導的細胞生長抑制檢測,；操作方法非常便捷、快速,。 保存條件：4°保存一年，-20°兩年,。 |
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目,，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時,，使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻,。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）,。
8、結(jié)果分析
a,、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞）,，各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
泛鈣,維生B5英文名稱： Indapamide4號染色體開放閱讀框51抗體包裝1g
泛鈉（標準品）英文名稱： Indapamide分支GBE1抗體包裝25g
泛昔洛韋（標準品）英文名稱： Iopamidol磷化絲切蛋白抗體包裝5g
泛影（標準品）英文名稱： Iopamidol補體成分5受體1抗體包裝1g
非布索坦(標準品)英文名稱： Loperamide HCl分裂周期2樣蛋白激6抗體包裝250mg
非洛地平(標準品)英文名稱： Loperamide HCl補體C3IP1抗體包裝5g
非洛地平雜質(zhì)Ⅰ（標準品）英文名稱： Ketorolac Tromethamine 磷化周期檢測點激2抗體包裝500mg
非那西丁(標準品)英文名稱： Ketorolac Tromethamine 周期依賴性激11抗體包裝1g
非諾貝特雜質(zhì)Ⅰ（標準品）英文名稱： Lansoprazole 周期依賴性激10包裝5g
非諾貝特雜質(zhì)Ⅱ（標準品）英文名稱： Lansoprazole 8號染色體開放閱讀框86抗體包裝100g
非諾洛芬鈣(標準品)英文名稱： L base磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝10g
非普拉宗（標準品）英文名稱： Levonorgestrel磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝25g
芬達唑；硫咪唑(標準品)英文名稱： Levonorgestrel磷化半胱蛋白蛋白6抗體包裝25MG
芬布芬（標準品）英文名稱： Levosulpiride9號染色體開放閱讀框172抗體包裝100g
酚磺乙（標準品）英文名稱： Levosulpiride磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑包裝25g
: AS3.16資源名稱: 曲霉 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,JP2002胸苷合成試劑盒五味子酚;Schisanhenol
糖霉菌Glycomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品性激結(jié)合球蛋白試劑盒衛(wèi)矛;Dulcitol
聚生殼菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%性別決定區(qū)Y蛋白試劑盒1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄
細胞增殖與毒性檢測試劑盒（CCK-8）大腸埃希 3-氯磺?；?4-氟沙眼衣原體IgMElisa
玉米黑粉 4-氯苯磺酰脲肝Elisa
香菇Cr04 β－內(nèi)啡肽,鼠前腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子Elisa
大腸埃希氏桿 2,5-二氟苯皰疹病-8型感染IgG抗體Elisa
尖孢鐮孢 甲基烯酸十二氟庚酯皰疹病-8型感染IgM抗體Elisa
彩色豆馬勃 2-(甲硫基)乙酰單純皰疹病1IgG抗體Elisa
熒光假單胞 Cys-Gly, oxidized單純皰疹病1IgM抗體Elisa
尖孢鐮刀 1-(4-氟苯基)哌EB病IgG抗體Elisa
扁柄側(cè)耳 2-氯-4-氟巨病IgM抗體Elisa
紅曲紅曲 2-氯-5-氟單純皰疹病2IgG抗體Elisa
褐囊蜜環(huán) 4-氨基-3-氟吡啶人類嗜T病抗體Elisa
釀酒酵母 Nefiracetam型肝炎病抗體Elisa
枯草芽孢桿 4-羥基吡啶-2-羧酸核糖核酸HElisa
黑曲霉 2-羥基甲酯EB病抗體Elisa
釀酒酵母 2-苯氧基血吸蟲抗體Elisa
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