多靶點(diǎn)抑制劑（Amuvatinib）公司正在出售的產(chǎn)品：phospho-PAK1(pSer144)/FITC 熒光標(biāo)記抗化p21激活激1抗體IgG
phospho-PAK2(pSer141)/FITC 熒光標(biāo)記抗化p21激活激2抗體IgG
JNK1/2/3/FITC 熒光標(biāo)記抗氨末端激1/2/3抗體 IgG
phospho-PAK3(pSer139)/FITC 熒光標(biāo)記抗化p21激活激3抗

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）,。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán),。
白僵菌凋亡原位（我公司提供代測(cè)服務(wù)）Escherichia coli小鼠癌標(biāo)志物-CA153

溜曲霉Escherichia coli小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199

谷棒桿菌Escherichia coli小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199

尖孢鐮刀菌Escherichia coli小鼠血紅氧合1(HO-1)

蚜蟲(chóng)枝孢Escherichia coli小鼠血紅氧合1(HO-1)

豇豆慢生根瘤菌Escherichia coli小鼠磷脂A2(PL-A2)

大腸埃希氏菌Escherichia coli小鼠磷脂A2(PL-A2)

白色類(lèi)諾氏菌（可定）Escherichia coli小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)

涎沫假絲酵母Escherichia coli小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)

殼青霉Escherichia coli小鼠水通道蛋白5(AQP-5)

臘梅擬莖點(diǎn)霉廣譜SP免疫組化（用于檢測(cè)兔,、大鼠、小鼠和豚鼠來(lái)源的一抗）Escherichia coli小鼠水通道蛋白5(AQP-5)

矩圓黑盤(pán)孢SP免疫組化(兔)Escherichia coli小鼠水通道蛋白4(AQP-4)

雅致放射毛霉SP免疫組化(小鼠)Escherichia coli小鼠水通道蛋白4(AQP-4)

塔賓曲霉T淋巴亞群檢測(cè)盒（SAP法）Escherichia coli小鼠水通道蛋白3(AQP-3)

Sphingobacteriaceae封閉用正常山羊血清（原液）Escherichia coli小鼠水通道蛋白3(AQP-3)

解酯假絲酵母解酯變種封閉用正常兔血清（原液）Escherichia coli小鼠水通道蛋白1(AQP-1)

鼻咽上皮細(xì)胞特異性蛋白1抗體血痕韌革菌小鼠綠色熒光標(biāo)記的肺癌細(xì)胞

軸突生長(zhǎng)誘向因子4抗體粘滑菇屬HSF（DMEM(高糖）+15%FBS 澳洲胎牛）

核基質(zhì)蛋白22復(fù)瓣黑刺革菌小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克（小鼠成纖維細(xì)胞）

神經(jīng)內(nèi)分泌轉(zhuǎn)化2抗體漏斗狀側(cè)耳人晶體上皮細(xì)胞永生系
多靶點(diǎn)抑制劑（Amuvatinib）終腐霉 哌-N,N-雙（2-羥基乙磺酸）

彩色豆馬勃 蝙蝠葛蘇林堿

頂孢頭孢霉 哌-N,，N-雙（2-乙磺酸鈉）

 哌-N,N-雙（2-乙磺酸）

厚垣孢普可尼亞 玉米黃

鴨疫里氏桿 N-(2-)哌-N'-4-丁磺酸

丁香假單胞 柯里京

費(fèi)氏中華根瘤 N-(2-)哌-N-乙磺酸鈉鹽

大豆慢生根瘤 千金藤

小單孢 N-(2-)哌-N-(2-乙磺酸)

球孢白僵 兒茶沒(méi)食子酸

釀酒酵母 N-(2-)哌-N-2-羥基磺酸鈉鹽

尖孢（可訂購(gòu)） N-(2-)哌-N-2-羥基磺酸

擬莖點(diǎn)霉 單咖啡酰

膠孢 N-(2-)哌-N-3-磺酸