SETD8賴氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑（UNC0379）公司*的產(chǎn)品：phospho-ERK1(Thr197/Thr202) /FITC 熒光標(biāo)記化絲裂原活化蛋白激1/2抗體IgG
phospho-CaMK2a (pThr286)/FITC 熒光標(biāo)記抗化鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗體IgG
phospho-CaMK2a(pTyr231) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠等化鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：SETD8賴氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑（UNC0379）

英文名稱：UNC0379

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究,；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；

6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

草青霉人肝再生增強(qiáng)因子Escherichia coli小鼠雌激(E)

玫瑰產(chǎn)色鏈霉菌人轉(zhuǎn)錄因子Tbx3 Escherichia coli小鼠周期D1(Cyclin-D1)

光帽鱗傘人高遷移率族蛋白B1 ELISA KitEscherichia coli小鼠周期D1(Cyclin-D1)

水稻節(jié)桿菌人水通道蛋白4Escherichia coli小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)

木霉小鼠乙酰受體-M1抗體Escherichia coli小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)

黃色雙孢放線菌大鼠乙酰受體-M1抗體Escherichia coli小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)

節(jié)桿菌人Ⅲ型膠原Escherichia coli小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)

墳?zāi)构?jié)桿菌FITC標(biāo)記CD3抗體 + PE標(biāo)記CD56抗體Escherichia coli小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)

樟疫霉人Ⅰ型膠原Escherichia coli小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)

貴州青霉小鼠凋亡相關(guān)因子配體Escherichia coli小鼠前列腺性磷(PAP)

芥黃蜜環(huán)菌人單純皰疹病Ⅰ型抗體Escherichia coli小鼠前列腺性磷(PAP)

耐酪冢村菌人神經(jīng)保護(hù)肽HN Escherichia coli小鼠前列腺特異性抗原(PSA)

短乳桿菌小鼠白介2Escherichia coli小鼠前列腺特異性抗原(PSA)

短梗霉屬人髓過氧化物Escherichia coli小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125

草木樨中華根瘤菌人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子Escherichia coli小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125

彎曲芽孢桿菌*小鼠前列腺E2Escherichia coli小鼠癌標(biāo)志物-CA153

乳腺癌細(xì)胞分化因子P45抗體Heregulinβ光滑環(huán)銹傘大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基

腎小球裂孔膜蛋白PDCN抗體野生紫孢側(cè)耳小鼠前脂肪胚胎成纖維細(xì)胞

硫軟骨蛋白多糖4/黑色瘤相關(guān)蛋白抗體血紅密孔菌小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞

腎病樣蛋白2抗體淡綠紅菇小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞
SETD8賴氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑（UNC0379）柔嫩艾耳球蟲 N,N-雙（2-）-2-氨基乙磺酸

土曲霉 3-[N-（1,，1-二甲基-2-）]氨基-2-羥烷磺酸鈉鹽

釀酒酵母 七葉皂苷C

粘著劍 3-[N-（1,，1-二甲基-2-）]氨基-2-羥烷磺酸

粉紅螺旋聚孢霉 七葉皂苷B

米曲霉 2-氨基-2-甲基-1,3-

鏈格孢 七葉皂苷A

棲土藤黃色單胞 2-氨基-2-甲基-1-

異配囊接霉 德爾塔林

特班齊赫鹽紅 N-(2-乙酰氨基)-亞氨基二乙酸二鈉鹽

蟹味菇（白） 硬飛燕草堿

紡織品  纖維含量（羊毛與聚酯纖維） N-(2-乙酰基)-2-亞氨基二乙酸

洛格酵母 去乙酰車葉草苷酸

米氏假單胞 N-（2-乙酰氨基）-2-氨基乙烷磺酸

梨黑星 哌-N,，N-雙（2-羥基乙磺酸）鈉鹽 

操作規(guī)程

1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2,、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3,、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時(shí),，使MTT 還原為甲臜。

6,、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻,。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8,、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無細(xì)胞）,，各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值,，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)