公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:HIV蛋白酶抑制劑(Darunavir Ethanolate)
英文名稱:Darunavir Ethanolate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Darunavir ethanolate(TMC114ethanolate)是一種用于治療和預(yù)防HIV/AIDS的HIV蛋白酶抑制劑。對(duì)野生型HIV-1蛋白酶的Ki值為1nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):635728-49-3 別名:TMC114 純度:99.73% 分子量:593.73 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
當(dāng)藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: IbudilastKB抑制蛋白激β抗體包裝5g
當(dāng)藥黃英文名稱: Ibudilast白介17受體D抗體包裝100g
黨參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gemcitabine白介-17B抗體包裝25g
黨參炔苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Thalidomide 吲哚乙/植物生長(zhǎng)單克抗體包裝500mg
德爾塔林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Thalidomide 白介4受體抗體IL-4Rα包裝25ml
燈臺(tái)葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cefazolin白介2受體γ鏈抗體包裝5ml
燈心草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cefazolin白介1受體1抗體包裝1g
燈心草酚英文名稱: Vindoline白介1受體2抗體包裝1g
燈盞細(xì)辛(燈盞花)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Theophylline白介20受體α鏈抗體包裝5g
地奧司明(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Benzoylmesaconine白介20受體β鏈抗體包裝1g
地膽草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Trigonelline吲哚乙抗體/植物生長(zhǎng)抗體包裝5g
地膚子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Succinic acid整合α6抗體包裝100g
地膚子皂苷Ic(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Succinic acid擬南芥IKI3抗體包裝25g
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: alpha-Boswellic acid白介5抗體包裝5g
地骨皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Eupalinolide A白介-1受體相關(guān)激1抗體包裝1g
假單胞菌Pseudomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:粘度≥0.005 pa.s顆粒H試劑盒黃芩苷;Baicalin
頂孢霉屬Acremonium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR顆粒B試劑盒黃藤;Palmatine chlori
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR顆粒A試劑盒灰氈毛忍冬皂苷乙;Macranthoid
HIV蛋白酶抑制劑(Darunavir Ethanolate)預(yù)知子(三葉木通)(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
愈創(chuàng)木Human, Mouse, Rat
鳶尾苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
鳶尾黃-7-O-木糖葡萄糖苷Human, Mouse
鳶尾黃(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
原阿片(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
原百部(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
原兒茶(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
原兒茶(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse