公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:c-Met抑制劑(PF-04217903)
英文名稱:PF-04217903
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
PF-04217903是ATP競爭性c-Met抑制劑,,IC50為4.8nM,對突變型Y1230C無活性,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:956905-27-4 純度:99.59% 分子量:372.38 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
孟氏假單胞菌Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠血纖蛋白原(Fbg)
哈茨木霉Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )
畢赤酵母Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )
產(chǎn)短桿菌Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠肌球蛋白(MYS)
不動桿菌Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠肌球蛋白(MYS)
雀斑蘑菇Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠結(jié)蛋白(Des)
分枝節(jié)桿菌Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠結(jié)蛋白(Des)
ppic9Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)
少根根霉Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)
加福尼亞鏈霉菌Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)
矮小傘枝霉Staphylococcus epidermidis大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)
菠蘿泛菌Staphylococcus aureus subsp. aureus大鼠干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)
凍土毛霉Staphylococcus equorum大鼠干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)
林生毛霉Staphylococcus sp.大鼠上皮中性?;罨?8(ENA-78/CXCL5)
金針菇(毛柄金錢菌,、冬菇)Staphylococcus sp.大鼠上皮中性粒活化肽78(ENA-78/CXCL5)
克魯斯假絲酵母Staphylococcus sp.大鼠抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)
肺表面活性蛋白B抗體木質(zhì)層孔菌總膽固(TC)比色法測試盒(單試劑COD-PAP法)
SEL1L抗體藍(lán)灰干酪菌脂質(zhì)過氧化物(LPO)比色法測試盒
5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體蟬花蟲草甘油三酯(TG)比色法測試盒(單試劑GPO-PAP法)
沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體毛栓菌高密度脂蛋白膽固(HDL-C)比色法測試盒(雙試劑直接法)
c-Met抑制劑(PF-04217903)白靈菇 氧化槐果堿
鏈霉鏈霉 兔肌動蛋白
馬腺疫鏈球獸疫亞種 莪術(shù)二酮
冷溫木克酵母 朝藿定A1
釀酒酵母 硫酸魚精蛋白
弗氏檸檬酸桿 黃柏堿
藤黃微球 刀豆球蛋白A
釀酒酵母 京尼平
環(huán)狀芽胞桿 毛蕊異黃酮苷
大腸埃希氏 毛蕊異黃酮
脆弱鏈霉 牡荊葡萄糖苷
中生根瘤 沒食子兒茶
根瘤 芒柄花苷
小皮傘 豆甾
釀酒酵母 轉(zhuǎn)鐵蛋白