PI3K/mTOR抑制劑(PQR309)公司正在出售的產(chǎn)品：Alpha1-MG(Mouse Alpha1-microglobulin) ELISA Kit 小鼠α1微球蛋白三鈣 98%，β-phase basis
MCP-4/CCL13(Mouse monocyte chemotactic protein 4) ELISA Kit 小鼠單核趨化蛋白4化鎘 CP,99.0%
PPAR- Alph

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲(chǔ)存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來,，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞,，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán)。
粉紅擲孢酵母生物標(biāo)記的驢抗羊IgGAnti-SATB1 Antibody肌單磷1(IMPA1)

慢生根瘤菌生物標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SATB1 Antibody肌脫氫(SARDH)

總狀橫梗霉PE-CY5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgMAnti-SCEL Antibody饑餓-O-乙?；D(zhuǎn)移(GOAT)

人蒼白桿菌PE標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SBCAD/ACADSB Antibody饑餓/肥胖抑制前激原(GHRL)

芽孢桿菌PE-Cy7標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SATB1 Antibody饑餓(GHRL)

蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種辣根過氧化物標(biāo)記的驢抗豚鼠IgGAnti-SCARB1 Antibody(PB0531)活性依賴性神經(jīng)保護(hù)因子(ADNP)

乳微桿菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCG3 Antibody活性氧物種調(diào)節(jié)因子1(ROMO1)

黃河張比齊奧氏菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCGB1A1 Antibody活化T-核因子2(NFATC2)

生活飲用水  氟生物標(biāo)記的驢抗豚鼠IgGAnti-SCGB1A1 Antibody回腸脂肪結(jié)合蛋白(FABP6)

黑曲霉Cy5標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCN11A Antibody恢復(fù)蛋白(RCVRN)

釀酒酵母PE-Cy3標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCN1A Antibody黃體激(LH)

半園田頭菇APC標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCLY Antibody脫氫(XDH)

雞傷寒沙門氏菌PE標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCN1B Antibody緩激肽(BK)

嗜熱脂肪地芽孢桿菌Cy3標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCN1B Antibody環(huán)指蛋白39(RNF39)

短桿狀馬賽菌Cy5.5標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCN4B Antibody環(huán)指CCCH-型鋅指蛋白域蛋白1(RC3H1)

白馬勃Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCNN1A Antibody環(huán)氧化合物水解4(EPHX4)

神經(jīng)細(xì)胞粘附分子2抗體土耳其凸臍孢菌大鼠肺成纖維細(xì)胞提取物

軸突蛋白1β/Neurexin1β抗體酵米面假單胞菌(酵米面黃桿菌)大鼠支氣管成纖維細(xì)胞提取物

NIPAL2蛋白抗體木耳（斜面）大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物

神經(jīng)營養(yǎng)因子HNT抗體灰樹花（斜面）大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞提取物
PI3K/mTOR抑制劑(PQR309)釀酒酵母 狼色酮

蜂房芽胞桿 四基化銨

嗜熱脂肪地球芽胞桿 人參皂苷Rs3

枯草芽孢桿 金堿

海洋嗜殺酵母 菊粉

黃桿 去甲血根堿

枯草芽孢桿 異櫻花苷

栗疫 2,5-二羥基苯甲

變棕溶桿 3,4'-O-二甲基鞣花酸

邊緣假單胞邊緣致病變種 ?？略碥赵?/span>

羊毛狀青霉 1-萘磷酸鈉鹽一水

微小桿 4,4'-O-二甲基鞣花酸

冰川薄層屬 對二甲氨基苯甲

 1,8-十七碳二烯-4,6-二炔-3,10-二

大腸埃希 人參環(huán)氧炔