商品介紹:
CCT128930是一種有效的選擇性Akt2抑制劑(IC50為6nM),,比作用于PKA激酶(IC50為168nM)選擇性高28倍,,比作用于p70S6K(IC50為120nM)選擇性高20倍。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:885499-61-6 純度:99.71% 分子量:341.84 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用,。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Akt2抑制劑(CCT128930) | CCT128930 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水),。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞,。
對于貼壁細胞,,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,,轉移到離心管內,,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,,離心收集細胞,共洗滌兩次,。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min,。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測),。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置,。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標,,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,,活細胞僅有很低強度的背景熒光,,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光,。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細胞膜完整性的細胞,,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%;優(yōu)質胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
鏈霉菌大鼠抑制AAnti-RAD51D Antibody人乙呋(AD)
孟氏假單胞菌小鼠Anti-RAD51B Antibody人乙呋(AD)
綠粘帚霉人原激活肽Anti-RALGAPA2 Antibody人唾液(SA)
黑曲霉人α1性糖蛋白Anti-RAD52 Antibody人唾液(SA)
短波單胞菌小鼠β葡糖苷Anti-RAD54B Antibody人鞘磷脂(SM)
地衣芽孢桿菌大鼠絨毛膜促性腺激βAnti-RAD54L Antibody人鞘磷脂(SM)
土壤成對桿菌大鼠性激結合球蛋白Anti-RALY Antibody人尿游離皮質(UFC)
枯草芽孢桿菌小鼠多巴Anti-RANBP17 Antibody人尿游離皮質(UFC)
冷桿菌屬人內皮型一氧化氮合成3Anti-RANBP6 Antibody人硫軟骨(CS)
葡萄座腔菌人二Anti-RANBP6 Antibody人硫軟骨(CS)
玉米大斑小鼠高靈敏度促甲狀腺激Anti-RANBP17 Antibody人硫皮膚(DS)
鮑魚側耳大鼠脫氫表雄S7Anti-RALY Antibody人硫皮膚(DS)
農(nóng)藥殘留速測儀(農(nóng))大鼠脫氫表雄Anti-RAP2A Antibody人硫類肝(HS)
香菇人胰淀Anti-RAP2C Antibody人硫類肝(HS)
腐皮鐮孢小鼠高敏甲狀腺Anti-RAP1GAP Antibody人硫角質(KS)
丁香暗黃鏈霉菌人血管活性腸肽Anti-RAP2B Antibody人硫角質(KS)
微管蛋白β輔助因子D抗體冬蟲夏草(斜面)CP70人卵巢癌細胞
結構蛋白家族2抗體樺褐孔菌(斜面)人乳頭狀肺腺癌細胞
先心病相關蛋白TBX1抗體茄病鐮刀菌(斜面)小鼠腦微血管內皮細胞
瞬時受體電位蛋白12抗體小麥褐斑長蠕孢霉(不提供)小鼠單核巨噬細胞白血病細胞
Akt2抑制劑(CCT128930)根霉 D-谷氨酰
坎氏魏斯氏 D-天冬酰一水物
短小克銀漢霉 L-氨酰鹽酸鹽
釀酒酵母 β-乙酯鹽酸鹽
尖鐮孢 D-異亮
礦砂脂環(huán)酸芽孢桿 CBZ-L-纈
短小芽孢桿 2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯
適鹽屬 芴甲氧羰酰琥珀酰亞
洋蔥伯克霍爾德氏 N-乙酰-D-脯
大腸埃希氏 N-乙酰-L-脯
冷桿 N-乙酰-D-亮
釀酒酵母 N-乙酰-D-色
N-乙酰-L-
海床游動微 N-乙酰-L-色
燕麥生凹臍蠕孢 L-酪叔丁酯