商品介紹:
PFI-1是一種有效的BET抑制劑,能夠有效抑制BRD4,,IC50值為0.22μM,。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1403764-72-6 純度:99.87% 分子量:347.39 儲存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:BET抑制劑(PFI-1)
英文名稱:PFI-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
葡萄汁酵母Pseudomonas syringae大鼠水通道蛋白0(AQP-0)
黑曲霉Pseudomonas syringae大鼠水通道蛋白2(AQP-2)
李克犁頭霉(傘枝梨頭霉)Pseudomonas syringae大鼠水通道蛋白2(AQP-2)
臭曲霉Pseudomonas syringae大鼠甲狀腺球蛋白(TG)
硫磺絢孔菌Pseudomonas syringae大鼠甲狀腺球蛋白(TG)
中慢生華癸根瘤菌Pseudomonas syringae大鼠抑制A(INH-A)
Dokdonella fugitivaPseudomonas syringae大鼠抑制A(INH-A)
PseudotripoconidiumPseudomonas syringae大鼠絨毛膜促性腺激β(β-CG)
小孢曲霉Pseudomonas taetrolens大鼠絨毛膜促性腺激β(β-CG)
耐堿成對桿菌Pseudomonas tolaasii大鼠性激結(jié)合球蛋白(SHBG)
圍小叢殼Pseudomonas tolaasii大鼠性激結(jié)合球蛋白(SHBG)
Pseudomonas tolaasii大鼠脫氫表雄S7(DHEA-S7)
球毛殼Pseudomonas tolaasii大鼠脫氫表雄S7(DHEA-S7)
球孢白僵菌Pseudomonas tolaasii大鼠脫氫表雄(DHEA)
葡萄座腔菌Pseudomonas tremae大鼠脫氫表雄(DHEA)
鈉線菌屬Pseudomonas veronii大鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)
核突觸蛋白α+β抗體大斗菇(大革耳)鈣(Ca)比色法測試盒
絲裂原活化蛋白激磷p38γ抗體多脂鱗傘(黃傘)總鐵結(jié)合力(TIBC)比色法測試盒
L選擇抗體柱狀田頭菇(茶樹菇,、楊樹菇)脂質(zhì)代謝 脂質(zhì)代謝 脂質(zhì)代謝 脂質(zhì)代謝 脂質(zhì)代謝
鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug+SNAIL抗體大杯傘游離脂肪(NEFA)比色法測試盒
BET抑制劑(PFI-1)金針菇(毛柄,、冬菇) DL2000 DNA Marker
Paraburkholderia sp. DNA Marker Ⅱ
其他質(zhì)粒種 山梔苷甲酯
黃曲霉 川續(xù)斷皂苷乙
枯草芽孢桿 DNA Marker I
釀酒酵母 1kb DNA LadderⅡ
Chryseobacterium jejuense 京尼平苷酸
大豆慢生根瘤 100bp DNA Ladder Ⅱ
淡紫擬青霉 100bp DNA Ladder I
橢園釀酒酵母 50bp DNA Ladder
德氏乳桿保加亞亞種 高范圍RNA Ladder
胡椒枯萎病 低范圍RNA Ladder
新疆鹽地桿 SDS-PAGE蛋白質(zhì)高分子量
空腸彎曲桿 SDS-PAGE蛋白質(zhì)中分子量
栗酒裂殖酵母 特女貞苷