Jumonji組蛋白去甲基酶抑制劑（JIB-04）公司*的產品：Mouse trypsin ELISA Kit 小鼠胰蛋白膽固 98%
ODF(Mouse osteoclast differentiation factor) ELISA Kit 小鼠破骨分化因子膽固 用于培養(yǎng),，99%（GC)
TLR-9/CD289(Mouse Toll-like receptor 9) ELISA ki

產品屬性：

中文名稱：Jumonji組蛋白去甲基酶抑制劑（JIB-04）

英文名稱：JIB-04

產品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究,；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控,；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大小,；

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化；

4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二,、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；

2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min,；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；

5、PBS沖洗細胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；

6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

哈茨木霉Alexa Fluor 647標記的羊抗雞IgGAnti-RXRA Antibody肌肌激(CKM)

亮白曲霉Alexa Fluor 488標記的羊抗雞IgGAnti-S100A10 Antibody肌紅蛋白(MYO)

伯克霍爾德菌*FITC標記的兔抗雞IgGAnti-S100A11 Antibody肌苷三磷(ITPA)

枯草芽胞桿菌辣根過氧化物標記的兔抗雞IgGAnti-S100A4 Antibody肌鈣腔蛋白(SRL)

松口蘑Alexa Fluor 350標記的兔抗雞IgGAnti-S100A6 Antibody肌鈣蛋白T()

普通變形桿菌*Alexa Fluor 488標記的兔抗雞IgGAnti-S100A6 Antibody肌鈣蛋白I(TNI)

中間氣單胞菌辣根過氧化物標記的驢抗兔IgGAnti-S100A7 Antibody肌動絲蛋白(AF)

地衣芽胞桿菌FITC標記的驢抗兔IgGAnti-S100A6 Antibody肌動蛋白束蛋白3(FSCN3)

巴氏醋桿菌堿性磷（AP）標記的驢抗兔IgGAnti-SACS Antibody肌動蛋白束蛋白2(FSCN2)

冰川薄層菌屬Cy5標記的驢抗兔IgGAnti-S100A9 Antibody肌動蛋白束蛋白(FSCN)

釀酒酵母Alexa Fluor 488標記的驢抗兔IgGAnti-S100A8 Antibody肌動蛋白γ1(ACTγ1)

總狀毛霉Alexa Fluor 555標記的驢抗兔IgGAnti-S100B Antibody肌動蛋白β(ACTβ)

枯草芽孢桿菌Alexa Fluor 647標記的驢抗兔IgGAnti-S100A9 Antibody肌蛋白(MSC)

圍小叢殼菌PE標記的兔抗狗IgGAnti-SAFB Antibody肌加氧(MIOX)

哈茨木霉生物標記的驢抗兔IgGAnti-SAMHD1 Antibody肌單磷3(IMPA3)

扇形側耳生物標記的羊抗兔IgGAnti-SAG Antibody肌單磷2(IMPA2)

間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體甲基營養(yǎng)型芽胞桿菌大鼠小腸平滑肌細胞提取物

核仁蛋白C23抗體疣孢漆斑菌大鼠直腸平滑肌細胞提取物

神經細胞穿透2抗體枯草芽胞桿菌大鼠腸上皮細胞提取物

A型流感核蛋白抗體禾谷鐮孢大鼠支氣管平滑肌細胞提取物
Jumonji組蛋白去甲基酶抑制劑（JIB-04）孟氏假單胞 磷酸三

黃曲霉 3-去氧蘇木查耳酮

解脂假絲酵母 焦棓酚紅

早熟艾美耳球蟲 3-沒食子酰基奎寧酸

大腸埃希氏 帕克

枯草芽孢桿 乳清蛋白

黃傘 三七皂苷T5

黃曲霉 佛波

金龜子綠僵 SA緩沖液

褐發(fā)網 Alpha-三烯酚

類干酪乳桿類干酪亞種 松香酸鈉

糙皮側耳 3-氧代坡模酸甲酯

異常畢赤酵母 貝萼皂苷元甲酯

細麗外擔 多索茶堿

白假絲酵母 Gama-三烯酚 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小,，細胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物,。

3,、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜,。

6,、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻,。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8、結果分析

a,、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞）,，各重復孔的OD 值取平均數±SD,。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值,，C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)