Lck/Src抑制劑(WH-4-023)公司*的產(chǎn)品：CD3/FITC 熒光標(biāo)記CD3蛋白抗體IgG硫亞鈰八水 99.9% metals basis
CD3/RBITC 紅色熒光羅丹明標(biāo)記CD3抗體IgG硫亞鈰,無水 97%
CD3/PE 熒光PE標(biāo)記CD3抗體IgG化鎳 CP,98.0%
CD4/FITC 熒光標(biāo)記CD4蛋白抗體IgG鈮粉 99.95% metals basis,

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Lck/Src抑制劑(WH-4-023)

英文名稱：WH-4-023

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,；

②生物膜與細(xì)胞器的研究,；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二,、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；

6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物,。

3,、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜,。

6,、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻,。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8、結(jié)果分析

a,、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無細(xì)胞）,，各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值,，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

普通變形桿菌胸腺β10抗原Anti-ENTPD1 Antibody人腫瘤特異性抗原(TSA)  

羅氏菌屬新型血管活性因子UCN抗原(小鼠,、大鼠)Anti-ENTPD1 Antibody人腫瘤特異性抗原(TSA)  

耐冷冷桿菌上游激因子1抗原Anti-EOMES Antibody人黑色瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)

孟氏假單胞菌泛蛋白Anti-EPG5 Antibody人黑色瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)

pBiFC-VN173 (Plasmid #22010)兔抗血管抑制蛋白1抗原Anti-EPGN Antibody人癌易感蛋白2(BRCA-2)

植物乳桿菌血管內(nèi)皮粘附分子抗原Anti-EPB41L2 Antibody人癌易感蛋白2(BRCA-2)

施氏假單胞菌血管內(nèi)皮粘附分子抗原Anti-EPHB4 Antibody人凋亡信號調(diào)節(jié)激I(ASK-1)

Chelativorans電壓依賴性陰離子通道抗原Anti-EPHA6 Antibody人凋亡信號調(diào)節(jié)激I(ASK-1)

淺被黑蛋巢血管內(nèi)皮生長因子(多肽抗原)Anti-EPHB2 Antibody人凋亡信號調(diào)節(jié)激I(ASK-1)

唾液鏈球菌血管內(nèi)皮生長因子A抗原Anti-EPHB6 Antibody人凋亡信號調(diào)節(jié)激I(ASK-1)

嘴突凸臍蠕孢血管內(nèi)皮生長因子C型抗原Anti-EPHX3 Antibody人Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)

中國擬迷孔菌血管內(nèi)皮生長因子受體2Anti-EPN1 Antibody人Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)

總狀共頭霉可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2Anti-EPHX4 Antibody人轉(zhuǎn)移因子(TF)

副氧化微桿菌血管內(nèi)皮生長因子受體-3（多肽）Anti-EPN2 Antibody人轉(zhuǎn)移因子(TF)

三葉草根瘤菌血管內(nèi)皮生長因子受體-3抗原Anti-EPN3 Antibody人結(jié)腸癌抗原(CCA)

雙孢蘑菇血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗原Anti-EPS8L2 Antibody人結(jié)腸癌抗原(CCA)

核轉(zhuǎn)錄因子抗體三線鐮孢菌人髓樣甲狀腺腫瘤細(xì)胞

轉(zhuǎn)錄因子SOX7抗體干酪乳桿菌人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞

卵子結(jié)合生成堿性螺旋蛋白抗體Naxibactervarians人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞

卵子結(jié)合生成堿性螺旋蛋白2抗體Lysinibacillusxylanilyticus人結(jié)直腸癌細(xì)胞
Lck/Src抑制劑(WH-4-023)葡萄座腔 L-交酯

PL28（平菇） DL-交酯

枯草芽孢桿 2,4-二羥基-6-甲酸

細(xì)黃鏈霉 2,，3-二甲基馬來酸

圍小叢殼 尿酸鈉

草酸青霉 2-哌

毛革蓋 紅藻

少根根霉原變種 12-氨基十二酸

腸球?qū)?/span> 2-噻吩甲酰三氟酮

沙福芽孢桿 3-(4-(二甲基氨基)苯基)-2-烯

大腸埃希氏桿 2-基-4-羥基

熱帶假絲酵母 二甲基磷酸

假單胞屬 1-苯基-1,2-二酮

水稻根瘤 鄰羥基芐

中華游動(dòng)微 嘧啶