mTOR激酶抑制劑(CC-223)公司*的產(chǎn)品：C-PC /FITC 熒光標(biāo)記C-藻藍(lán)/藻藍(lán)蛋白抗體IgG環(huán)唑 分析標(biāo)準(zhǔn)品
C-Peptide( C-PEP )/FITC 熒光標(biāo)記C-肽抗體IgG環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00mg/ml
CPSA/FITC 熒光標(biāo)記鼠抗人復(fù)合前列腺特異性抗原單克隆抗體IgG精喹禾靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.7%
CPSF4/CPSF30/FITC 熒光標(biāo)記剪切和多

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：mTOR激酶抑制劑(CC-223)

英文名稱：CC-223

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究,；

③細(xì)胞骨架體系的研究,；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1,、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大小,；

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

泡盛曲霉熒光Cy3標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對(duì)照)Anti-IL37 Antibody人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)

大腸埃希氏菌熒光Cy3標(biāo)記羊IgG(流式同型對(duì)照)Anti-IL6 Antibody人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)

玫瑰菌核鏈霉菌熒光Cy3標(biāo)記大鼠IgG(流式同型對(duì)照)Anti-ILF3 Antibody人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)

墳?zāi)构?jié)桿菌熒光Cy3標(biāo)記牛IgGAnti-IL9R Antibody人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)

假絲酵母屬熒光Cy3標(biāo)記牛IgMAnti-INA1 Antibody人前病整合位點(diǎn)1(Pim1)

戴爾根霉熒光Cy3標(biāo)記雞IgGAnti-IL6 Antibody人前病整合位點(diǎn)1(Pim1)

花土溝游動(dòng)微菌熒光Cy3標(biāo)記雞IgMAnti-ILKAP Antibody人綠膿桿菌外A(PEA)

弗雷德里克斯堡假單胞菌熒光Cy3標(biāo)記狗IgGAnti-ING1 Antibody人綠膿桿菌外A(PEA)

沃特曼籃狀菌熒光Cy3標(biāo)記羊IgMAnti-ING4 Antibody人流感病A(FLU A)

半園田頭菇熒光Cy3標(biāo)記豚鼠IgGAnti-ING3 Antibody人流感病A(FLU A)

彩色豆馬勃熒光Cy3標(biāo)記豚鼠IgMAnti-ING4 Antibody人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)

根瘤菌熒光Cy3標(biāo)記馬IgGAnti-ING5 Antibody人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)

大腸埃希氏菌熒光Cy3標(biāo)記馬IgMAnti-INHBA Antibody人抗乙型肝炎病核心抗體(HBcAb)

污水土地桿菌熒光Cy3標(biāo)記人IgGAnti-INHBB Antibody人抗乙型肝炎病核心抗體(HBcAb)

多主葡萄殼菌熒光Cy3標(biāo)記人IgMAnti-INHBE Antibody人抗乙型肝炎病核心IgM抗體(HBcAb-IgM)

黑木耳熒光Cy3標(biāo)記人IgAAnti-INHBC Antibody人抗乙型肝炎病核心IgM抗體(HBcAb-IgM)

Ras樣蛋白B抗體謝瓦曲霉人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白5抗體鹿皮色曲霉小鼠骨樣細(xì)胞

原癌基因相關(guān)蛋白RAP2B抗體炭黑曲霉人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞

環(huán)指蛋白6抗體泡盛曲霉煙色變種人套細(xì)胞淋巴瘤
mTOR激酶抑制劑(CC-223)鏈霉 Rubelloside B

產(chǎn)氣莢膜梭 B型 長(zhǎng)壽花糖甙

外海橄欖形 槐雙氫黃酮

蜂蜜接合酵母 Rivulobirin E

假密環(huán) 槲皮-3-D-木糖甙

球色單隔孢屬 Randaiol

深酒紅短鏈游動(dòng) Rabdoketone B

瑞士乳桿 R(+)-戈米辛 M1

蘋果鏈格孢 3-O-beta-D-葡糖苷雞納酸酯

巨大芽孢桿 Quinamine

米黑根毛霉 Pyrroside B

耐冷冷桿 Putraflavone

火雞皰疹病(+)陽(yáng)性血清 Pseudopalmatine

構(gòu)巢裸胞殼 Przewaquinone A

解脂假絲酵母解脂變種 紫丹參萜 

操作規(guī)程

1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2,、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3,、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時(shí),，使MTT 還原為甲臜。

6,、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻,。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8,、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)