嘧啶合成抑制劑(Leflunomide)公司*的產(chǎn)品：PABA(Human para-aminobenzoic acid) ELISA Kit 人對(duì)氨苯氧化釔 99.999% metals basis
LPA(Human L-phenylalanine) ELISA Kit 人苯氨氧化釔 99.99% metals basis ,50nm
Irna(Human Immune RNA) E

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：嘧啶合成抑制劑(Leflunomide)

英文名稱(chēng)：Leflunomide

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|50mg|100mg|500mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究,；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二,、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

乳乳球菌RAS癌基因相關(guān)蛋白R(shí)ab6C抗體Anti-CXCL3 Antibody脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(CETP)

香魚(yú)假單胞菌RAP1GAP激活蛋白抗體Anti-CXCL2 Antibody脂質(zhì)運(yùn)載蛋白9(LCN9)

博伊丁酵母原癌基因酪蛋白激受體RET/多發(fā)性?xún)?nèi)分泌腺瘤和甲狀腺髓樣癌蛋白抗體Anti-CXCL16 Antibody脂質(zhì)運(yùn)載蛋白8(LCN8)

拉曼被孢霉磷化原癌基因酪蛋白激受體RET抗體Anti-CXCL5 Antibody脂質(zhì)運(yùn)載蛋白6(LCN6)

馬克斯克魯維酵母馬克斯變種G蛋白家族RAB21蛋白抗體Anti-CXCL9 Antibody脂質(zhì)運(yùn)載蛋白15(LCN15)

貝氏不動(dòng)桿菌泛結(jié)合蛋白P62抗體Anti-CXCL8 Antibody脂質(zhì)運(yùn)載蛋白12(LCN12)

蛹蟲(chóng)草Rap2A抗體Anti-CXCL8 Antibody脂質(zhì)運(yùn)載蛋白10(LCN10)

粉狀畢赤酵母胰島β生長(zhǎng)因子Reg IIIγ抗體Anti-CXCR1 Antibody脂質(zhì)運(yùn)載蛋白1(LCN1)

爪哇根霉胰島β生長(zhǎng)因子Reg IIIα 抗體Anti-CXCL9 Antibody脂3(LPIN3)

假單胞菌核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A抗體Anti-CXCR2 Antibody脂2(LPIN2)

變幻青霉RFTN2蛋白抗體Anti-CXCR2 Antibody脂1(LPIN1)

蒙古鹽單胞菌環(huán)指蛋白213Anti-CXCR2 Antibody脂生蛋白(ADIG)

室內(nèi)外電子溫濕度計(jì)受體結(jié)合絲蘇激3抗體Anti-CXCR1 Antibody脂解激活脂蛋白受體(LSR)

堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌受體結(jié)合絲蘇激5抗體Anti-CXCR3 Antibody(PB0038)脂肪型脂肪結(jié)合蛋白(FABP4)

黃孢原毛平革菌RNA結(jié)合蛋白15抗體Anti-CXCR4 Antibody脂肪膜關(guān)聯(lián)蛋白(APMAP)

綠色木霉環(huán)指蛋白47抗體Anti-CXCR4 Antibody脂肪轉(zhuǎn)移2(LIPT2)

半裸鐮孢Fusarium│semitectum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

日本蟲(chóng)草廣東變型Cordyceps│japonica f. guangdongensis 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

雞腿菇（毛頭鬼傘）Coprinus│comatus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
嘧啶合成抑制劑(Leflunomide)鹽反硝化枝芽孢桿 MiddleBrook7H10瓊脂硫酸肝糖蛋白Elisa

匍匐曲霉原變種 MiddleBrook7H11瓊脂硫酸類(lèi)肝Elisa

大豆慢生根瘤 曲霉瓊脂基礎(chǔ)(AFPA)硫酸軟骨Elisa

青色鏈霉 假單胞分離瓊脂卵磷脂Elisa

淡紫灰吸水鏈霉 knudson糜蛋白Elisa

釀酒酵母 TGE培養(yǎng)基球蛋白AElisa

 MMO-MUG培養(yǎng)基球蛋白EElisa

葡萄牙棒孢酵母 硫細(xì)培養(yǎng)基球蛋白GElisa

假單胞屬 GVPC瓊脂基礎(chǔ)球蛋白G1Elisa

栗酒裂殖酵母 霉培養(yǎng)基球蛋白G2Elisa

藤黃微球 ASS瓊脂球蛋白G2aElisa

乳酸片球 AC肉湯球蛋白G2bElisa

阿納托利亞正青霉 細(xì)L型增液球蛋白G3Elisa

核盤(pán) 細(xì)L型分離瓊脂球蛋白G4Elisa

平菇 溶血瓊脂基礎(chǔ)球蛋白MElisa 

操作規(guī)程

1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2,、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí),，使MTT 還原為甲臜,。

6、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8,、結(jié)果分析

a,、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無(wú)細(xì)胞）,，各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值,，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)