商品介紹:
PF-06726304是有效,,選擇性的EZH2抑制劑,,Ki值為0.7nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):1616287-82-1 分子量:446.33 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:EZH2抑制劑(PF-06726304)
英文名稱:PF-06726304
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
小鼠脂聯(lián)素(Adiponectin)ELISA試劑盒 ,,英文名: Adiponectin ELISA Kit
牛檸檬酸合成酶(CS)ELISA檢測(cè)試劑盒BovineCiateSyhetase,CSELISAKit 96T/48T
人alpha-1腎上腺素能受體(ADRA1)IgG抗體免疫試劑盒 人alpha-1腎上腺素能受體(ADRA1)IgG抗體ELISA Kit
英文名稱MouseIerleukin-2ELISAkit小鼠白介素2(IL-2)規(guī)格:96T/48T
冰凍切片總脂酶活性格莫瑞(Gomori)染色試劑盒50次
RatCiliaryNeuroophicFactor,CFELISA試劑盒大鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素11受體α(IL11Rα)ELISA試劑盒 ,,英文名: IL11Rα ELISA Kit
人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanvisfatinELISAKit 96T/48T
大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒 Rat Haptoglobin,Hpt/HP ELISA KIT
英文名稱RatsCD86ELISAKit大鼠sCD86(sCD86)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
咖啡糖精(saccharin)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitDsg-1人橋粒芯糖蛋白-1規(guī)格:48T/96T
豬壞死因子α(TNF-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human melanoma marker (MA/Melan-A) ELISA Kit 人黑色素瘤標(biāo)記物(MA/Melan-A)ELISA試劑盒
Rabbitai-glycoproteinaibody,GPELISAKit 兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforapo-B100(RabbitapoproteinB100)ELISAKit兔載脂蛋白B100規(guī)格:48T/96T
血清/血漿游離脂肪酸酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒10次
Porcinelipoproteinα,Lp-αELISAKit豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
EZH2抑制劑(PF-06726304)Seladin 1 英文名稱: 24脫氫還原酶抗體 0.2ml
FAM36A 英文名稱: FAM36A蛋白抗體 0.2ml
巨噬細(xì)胞趨化蛋白-1抗體 Anti-MCP-1 0.1ml
Anti-RNF148/FITC 熒光素標(biāo)記環(huán)指蛋白148抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PIK3C3(Ser676) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶3催化亞單位3抗體 規(guī)格 0.1ml
AACT(Alpha-1-Anti-chymotrypsin) α-1抗胰糜蛋白酶Multi-class antibodies規(guī)格: 10mg