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Caspase 3活性檢測試劑盒(比色法)

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更新時間:2022-04-21 12:11:55瀏覽次數(shù):280

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20T
貨號 GOY-01X9628 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric
Caspase 3活性檢測試劑盒(比色法)公司*的產(chǎn)品:Cyclin F 周期F抗體正丁 ≥99.9%, FCC
Cyclin G 周期G抗體水楊丁酯 99%
Cyclin H 周期H抗體丁酯 ≥99%, FCC
Cystatin 3/CST3 胱抑C/半胱氨蛋白抑制劑C抗體苯縮 98%
Cytoglobin 球蛋白抗體苯縮 98%, Kosher
CYLD 微管結(jié)合蛋白CY

詳細介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞生物學研究有以下幾個方面:

細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細胞核、染色體以及基因表達的研究,;

②生物膜與細胞器的研究,;

③細胞骨架體系的研究;

④細胞增殖及其調(diào)控,;

⑤細胞分化及其調(diào)控,;

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細胞的起源與進化,;

⑧細胞工程.

產(chǎn)品屬性:

中文名稱:Caspase 3活性檢測試劑盒(比色法)

英文名稱:Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric

產(chǎn)品規(guī)格:20T

發(fā)貨周期:1~3天

商品介紹:

Caspase 3,,即Cysteine-requiring Aspartate Protease 3,也稱CPP32、Yama或apopain,,屬于Caspase家族的CED-3亞家族(CED-3 subfamily),,系一種在細胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶,也是哺乳動物細胞中研究多的一個Caspase,。 Caspase 3可以剪切procaspase 3,、6、7和9,,且可以直接特異性剪切多種Caspase底物,,包括PARP(poly(ADP-ribose)polymerase)、ICAD(Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease),、gelsolin和fodrin等,。這些由Caspase 3介導的蛋白剪切是細胞凋亡分子機制的重要組成部分。另外,,caspase 3在細胞核凋亡和細胞起泡(Cell blebbing)過程中也起到了關(guān)鍵作用,,包括染色質(zhì)固縮(chromatin condensention),DNA片段化(DNA fragmentation)等,。

Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric是一款簡單快速檢測細胞或組織內(nèi)Casepase 3活性的試劑盒,,其檢測原理是基于Casepase 3可以催化底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)產(chǎn)生黃色的pNA(p-nitroaniline),pNA在405nm附近有強吸收,,從而可以通過測定吸光度來檢測Caspase 3的活性(黃色產(chǎn)物與Caspase 3酶的活性成正比),。 另外,本試劑盒中還提供了Caspase 3催化產(chǎn)生的黃色產(chǎn)物pNA,,以此作為定量caspase 3酶活性的標準品,。

試劑盒組份:

Lysis Buffer裂解液————8ml

Assay Buffer檢測緩沖液——8ml

Ac-DEVD-pNA(2mM)—————200μl

pNA(10mM)————————200μl

儲存條件:-20℃

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;

3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化,;

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

二,、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;

2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;

3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;

4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;

5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;

6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1,、在96孔板加入細胞100μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物,。

3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。

6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。

7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8,、結(jié)果分析

a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

溶血卵磷脂?;D(zhuǎn)移3(LPCAT3)英文名稱:LPCAT3 ELISA Kit貓眼綜合征染色體候選基因6抗體包裝25g

溶血卵磷脂?;D(zhuǎn)移2(LPCAT2)英文名稱:LPCAT2 ELISA Kit21號染色體開放閱讀框2抗體包裝25mg

溶血卵磷脂酰基轉(zhuǎn)移1(LPCAT1)英文名稱:LPCAT1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框86抗體包裝25G

溶血磷脂受體3(LPAR3)英文名稱:LPAR3 ELISA Kit21號染色體開放閱讀框128抗體包裝5G

溶體性磷2(ACP2)英文名稱:ACP2 ELISA Kit6號染色體開放閱讀框62抗體包裝100g

妊娠關(guān)聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)英文名稱:PAPPA ELISA KitCCZ1蛋白抗體包裝500g

熱休克轉(zhuǎn)錄因子4(HSF4)英文名稱:HSF4 ELISA Kit腦蛋白5抗體包裝1g

熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)英文名稱:HSF1 ELISA Kit21號染色體開放閱讀框58抗體包裝5g

熱休克蛋白β8(HSPβ8)英文名稱:HSPβ8 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框43抗體包裝1g

熱休克蛋白β6(HSPβ6)英文名稱:HSPβ6 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框43抗體包裝5g

熱休克蛋白β2(HSPβ2)英文名稱:HSPβ2 ELISA Kit幾丁質(zhì)3樣蛋白3抗體包裝100ml

熱休克蛋白40(HSP40)英文名稱:HSP40 ELISA Kit趨化樣因子超家族成員2抗體包裝500ml

染色質(zhì)裝配因子1亞基B(CHAF1B)英文名稱:CHAF1B ELISA Kit趨化樣因子超家族成員2亞型1抗體包裝1g

染色質(zhì)域解旋DNA結(jié)合蛋白4(CHD4)英文名稱:CHD4 ELISA Kit18號染色體開放閱讀框1抗體包裝5g

染色框同源物3(CBX3)英文名稱:CBX3 ELISA Kit色c氧化VIIA亞型2抗體包裝100g

黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:> 95%,BR主要組織相容性復合體,,II類,,DQα2試劑盒知母皂苷E;Anemarsaponin

蜜蜂生球擬酵母Torulopsis│apicola 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標準品周期依賴性激5試劑盒知母皂苷元;Sarsasapogenin

乳乳球菌Lactococcus│lactis 質(zhì)量規(guī)格:純度> 98%,BR,可用于培養(yǎng)周期依賴性激4試劑盒醉椒;Kavain
Caspase 3活性檢測試劑盒(比色法)假交替單胞 2-異基乙酰乙酸乙酯血清腫瘤相關(guān)物質(zhì)Elisa

豬瘟病 2,3,5-三氟溴苯血清總補體Elisa

擬青霉 2-氨基異乙酯血栓海綿蛋白Elisa

蘇云金芽胞桿肯尼亞亞種 2-氨基煙乙酯血栓前體蛋白Elisa

四川散斑殼 N-(芐氧羰基)-1H-吡唑-1-甲脒血栓A2Elisa

柱狀田頭菇 乙酸異辛酯血栓B2Elisa

耐冷冷桿 乙酸異丁酯血栓調(diào)節(jié)蛋白Elisa

栗疫 2,4,6-基-3-環(huán)己烯-1-甲,;異環(huán)檸檬血糖Elisa

梨葉殼小圓孢 氯代單丁基錫酸血纖蛋白原降解產(chǎn)物Elisa

熱帶假絲酵母 2,,4-二氯-3,5-二酚血纖維蛋白溶原Elisa

節(jié)桿 N-BOC-1H-吡唑-1-甲脒血小板VASP;P2Y12Elisa

Pseudarthrobacter 3,4,5-氧基苯乙血小板第三因子Elisa

微桿 3-甲基硫代酸已酯血小板第四因子Elisa

釀酒酵母 普施安藍 MX-R血小板反應(yīng)蛋白;凝血敏感蛋白1Elisa

深藍鐮孢 3--2-甲酸血小板反應(yīng)蛋白4Elisa


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