產(chǎn)品屬性:
中文名稱:KDM5B抑制劑(AS8351)
英文名稱:AS8351
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
AS8351是一種KDM5B抑制劑,可以誘導和維持有活性的染色質(zhì)標記從而促進心肌細胞樣細胞的產(chǎn)生,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:796-42-9 純度:99.70% 分子量:291.3 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究,;
②生物膜與細胞器的研究,;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細胞分化及其調(diào)控,;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化,;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
芐雜質(zhì)A(標準品)英文名稱: Anidulafungin著絲粒蛋白Q抗體包裝1g
別嘌(標準品)英文名稱: Ansamitocin P-3CENTA2蛋白抗體包裝5g
泊酚(標準品)英文名稱: Aprepitant胞吞再循環(huán)相關(guān)銜接蛋白CENTB1抗體包裝1g
谷(標準品)英文名稱: Tenofovir磷化胞吞再循環(huán)相關(guān)銜接蛋白CENTB1抗體包裝25g
磺舒(標準品)英文名稱: TenofovirCENTD1蛋白抗體包裝5g
硫氧嘧啶(標準品)英文名稱: AripiprazoleCENTG3蛋白抗體包裝100ml
硫異煙(標準品)英文名稱: Aripiprazole中心體蛋白3抗體包裝25ml
睪(標準品)英文名稱: Ascomycin,FK520中心體蛋白1+2抗體包裝500ml
交沙霉(標準品)英文名稱: Ascomycin,FK520中心體蛋白2抗體包裝25g
倍他索(標準品)英文名稱: Atazanavir中心體蛋白CEP120抗體包裝5g
戊鎂(標準品)英文名稱: Atazanavir中心體蛋白CEP128抗體包裝5g
戊鈉(標準品)英文名稱: Atomoxetine HCl中心體蛋白CEP170抗體包裝1g
波生坦合(標準品)英文名稱: Atomoxetine HCl尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子4抗體包裝25g
泊沙康唑(標準品)英文名稱: Atovaquone銅轉(zhuǎn)運蛋白CUTC抗體包裝5g
(標準品)英文名稱: AtovaquoneCUTL1蛋白抗體包裝1g
木霉Trichoderma│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%血管緊張Ⅰ轉(zhuǎn)化試劑盒香蒲新苷;typhaneoside
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%血管緊張Ⅰ受體抗體試劑盒辛夷脂;Fargesin
出芽短梗霉Aureobasidium│pullulans 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品血管緊張Ⅰ試劑盒小豆蔻明;cardamonin
KDM5B抑制劑(AS8351)銜接蛋白β抗體Ⅷ(FⅧ)檢測試劑盒FⅧ ELISA Kit
銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體Ⅶ(FⅦ)檢測試劑盒FⅦ ELISA Kit
水通道蛋白-9抗體Ⅵ(FⅥ)檢測試劑盒FⅥ ELISA Kit
膜粘連蛋白A3抗體Ⅴ(FⅤ)檢測試劑盒FⅤ ELISA Kit
膜粘連蛋白 A4抗體Ⅳ(FⅣ)檢測試劑盒FⅣ ELISA Kit
自噬相關(guān)蛋白8A抗體Ⅲ(FⅢ)檢測試劑盒FⅢ ELISA Kit
磷化蛋白激B抗體Ⅱ(FⅡ)檢測試劑盒FⅡ ELISA Kit
磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗體Ⅰ(FⅠ)檢測試劑盒FⅠ ELISA Kit
磷化蛋白激B抗體凝血原片段F1+2(F1+2)檢測試劑盒F1+2 ELISA Kit
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)