商品介紹:
ML216(CID-49852229)是一BLM解螺旋酶有效抑制劑,對(duì)BLM full length和BLM636–1298的IC50值分別為3.0uM和0.97uM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):1430213-30-1 別名:CID-49852229 純度:98.66% 分子量:383.32 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
BLM解螺旋酶抑制劑(ML216) | ML216 | 5mg|10mg|25mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,,500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
3) 收集細(xì)胞后,,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,,共洗滌兩次,。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
葡萄座腔菌小鼠血小板因子3Anti-NTS Antibody大鼠一氧化氮(NO)
福氏志賀氏菌大鼠胰島自身抗體Anti-NUB1 Antibody大鼠一氧化氮(NO)
釀酒酵母人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1Anti-NUMA1 Antibody人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)
熒光假單胞菌生物型F小鼠白介2受體Anti-NUP35 Antibody人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)
魯氏酵母大鼠抗核膜糖蛋白210抗體Anti-NUP93 Antibody人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)
諾爾氏菌屬小鼠腎上腺髓質(zhì)Anti-NUP160 Antibody人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)
釀酒酵母大鼠可溶性Toll樣受體6Anti-NUP88 Antibody人脂聯(lián)(ADP)
新疆黃桿菌人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因Anti-NUSAP1 Antibody人脂聯(lián)(ADP)
紅蠟盤(pán)菌人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子CAnti-NUTF2 Antibody人組(HIS)
根瘤菌大鼠可溶性Toll樣受體2Anti-NVL Antibody人組(HIS)
東方伊薩酵母小鼠可溶性瘦受體Anti-NUTM1 Antibody人抵抗(Resistin)
湖沉積物紫色小桿菌人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子BAnti-NXF1 Antibody人抵抗(Resistin)
盤(pán)多毛孢大鼠前列腺F2αAnti-NXF3 Antibody人骨特異性堿性磷B(ALP-B)
不動(dòng)桿菌小鼠β內(nèi)啡肽受體Anti-NXF1(TAP) pAb人骨特異性堿性磷B(ALP-B)
辣乳菇人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子Anti-NXPH3 Antibody人骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)
白僵菌大鼠白三烯E4Anti-NXPH1 Antibody人骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)
視網(wǎng)膜感光細(xì)胞外節(jié)膜蛋白1抗體茶新菇ACH-4人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞
DNA修復(fù)蛋白R(shí)ad50抗體紫褐牛肝菌小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞
RecQ解旋樣蛋白5抗體污膠鼓菌人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
單鏈結(jié)合蛋白70抗體杯蕈2號(hào)大鼠乳腺癌細(xì)胞
BLM解螺旋酶抑制劑(ML216)耐熱鹽土生古 油酸鈉
角磷灰鵝膏 月桂酸鈉
嗜松青霉 氫鈉
假單胞屬 2-萘磷酸鈉鹽
大腸埃希 1-萘磷酸鈉鹽
釀酒酵母 二乙基二硫代鈉
大腸桿 鎢酸鈉
東海微泡 錫酸鈉
拒霉鏈霉 焦硫酸鈉
雞傷寒沙門(mén)氏 多聚磷酸鈉
莖點(diǎn)霉 磷鎢酸鈉
豬屎豆根瘤 化鈉
桃中田殼小圓孢 六偏磷酸鈉
南方青霉 亞鐵化鈉
釀酒酵母 無(wú)水偏釩酸鈉