商品介紹:
Lamivudine為核苷類似物,,是逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑,IC50為2.7mM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):134678-17-4 純度:99.64% 分子量:229.26 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(Lamivudine)
英文名稱:Lamivudine
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
連翹酯苷E(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Hydroxy-5-nitronicotinic acidB淋巴生發(fā)中心相關(guān)蛋白抗體包裝25g
蓮心堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hexatriacontane鱗狀癌增強(qiáng)蛋白1抗體包裝5g
蓮心堿高鹽英文名稱: HexatriacontaneGα gust抗體包裝1g
蓮心堿高鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hexadecane谷??贵w包裝10g
蓮須(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hexadecane絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCMa抗體包裝50g
蓮子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-HexanolG蛋白結(jié)合蛋白5抗體包裝1g
蓮子心(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Hexanol腫瘤/抗原家族4亞型7抗體包裝25g
兩面針(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-HexadecanolGDNF家族受體α3抗體 GFR α3包裝5g
亮菌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1,6-Hexanediol甘受體β/GlyR β抗體包裝100g
遼東楤木皂苷X(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Heptadecane神經(jīng)甘肽樣肽GALP抗體包裝25g
了哥王(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hentriacontane甘肽受體2抗體包裝5g
烈香杜鵑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hexacosane甘肽受體3抗體包裝1g
烈香杜鵑油(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2,5-Hexanedione腦腸肽受體抗體包裝25g
林生續(xù)斷苷I英文名稱: 2,5-HexanedioneGRC5蛋白抗體包裝5g
林澤蘭內(nèi)酯B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3',3'',5',5''-Tetrabromophenolphthaleinethyl ester腸和大腦特定同源蛋白1抗體包裝1g
熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,可用于培養(yǎng)羥脯試劑盒沒食子兒茶;(-)-Gallocate
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品強(qiáng)啡肽試劑盒木糖;D-Xylose
蛹假交替單胞菌Pseudoalteromonas│undina 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%潛伏轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β結(jié)合蛋白2試劑盒3-O-沒食子酰粘;3-O-gallo
逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(Lamivudine)鹽美Human
鹽帕他莫Human, Mouse
鹽維林Human
鹽Human, Mouse
鹽達(dá)泊(混旋)Human, Mouse
鹽達(dá)泊(右旋)Human, Mouse, Rat
鹽氮卓斯汀Human, Mouse
鹽地芬尼多Human, Mouse
鹽丁Human, Mouse, Rat