產品屬性:
中文名稱:HDAC6抑制劑
英文名稱:Tubastatin A Hydrochloride
產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
Tubastatin A Hydrochloride是一種有效的,,選擇性的HDAC6抑制劑,IC50值為15nM,,對其選擇性是HDAC8外的其他亞型的1000多倍,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1310693-92-5 別名:Tubastatin A HCl;TSA HCl 純度:97.32% 分子量:371.86 儲存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用,。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究,;
③細胞骨架體系的研究,;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控,;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化,;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大腸埃希氏菌血管擴張激磷蛋白抗體Anti-MBD2 Antibody溶血磷脂Ⅰ(LYPLA1)
球孢白僵菌磷化血管擴張激磷蛋白抗體Anti-MBD4 Antibody溶神經(jīng)(NLN)
枯草芽孢桿菌磷化血管內皮生長因子受體2抗體Anti-MBD2 Antibody溶體性磷2(ACP2)
松鼠葡萄球菌松鼠亞種磷化血管內皮生長因子受體2抗體Anti-MBD4 Antibody溶體關聯(lián)膜蛋白2(LAMP2)
藤倉赤霉磷化血管內皮生長因子受體2抗體Anti-MBL2 Antibody溶體關聯(lián)膜蛋白1(LAMP1)
豬丹絲菌血管內皮粘附分子抗體Anti-MBP Antibody絨毛膜促性腺激α肽(CGα)
梨形游動放線菌纈抗體Anti-MBNL1 Antibody絨毛膜促性腺激(CG)
單色云芝血管粘附蛋白1抗體Anti-MBL2 Antibody絨毛蛋白1(VIL1)
釀酒酵母間粘附蛋白Vinexin抗體Anti-MC1R Antibody相關血漿蛋白A2(PAPPA2)
彩色豆馬勃波形蛋白抗體Anti-MC3R Antibody特異性β1-糖蛋白(PSG1)
人參土獨島桿菌維生A抗體Anti-MC2R Antibody關聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)
栗疫菌蛋白聚糖Versican抗體Anti-MCAM Antibody帶蛋白(PZP)
芽孢桿菌屬VWCE抗體Anti-MC4R Antibody17-β-羥基類固脫氫14(HSD17β14)
紅曲紅曲視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關蛋白VAX1抗體Anti-MCAM Antibody熱休克轉錄因子4(HSF4)
枯草芽孢桿菌枯草亞種視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關蛋白VAX2抗體Anti-MCL1 Antibody熱休克轉錄因子2(HSF2)
休哈塔假絲酵母維生D3受體抗體Anti-MCM2 Antibody熱休克轉錄因子1(HSF1)
第10號染色體開放閱讀框27抗體樹干畢赤酵母大鼠腦動脈血管平滑肌細胞
SH2B蛋白抗體裂褶菌(斜面)大鼠腦膜成纖維細胞
環(huán)指蛋白142抗體非脫羧勒克菌大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞
SH2結構域轉化蛋白1抗體燕麥食菌燕麥亞種大鼠腦靜脈血管內皮細胞
HDAC6抑制劑龍勝鏈霉 對異基苯神經(jīng)肽YElisa
植物乳桿 糖精生長促乳Elisa
Aurantimonas altamirensis 二十五烷生長Elisa
腸桿 二苯硫生長受體Elisa
牛絲膜 十六烯生長抑Elisa
淺黃色假單胞 乙烯硫脲瘦Elisa
釀酒酵母 4,4'-二二苯甲酮絲氨酸蛋白Elisa
云芝栓孔(變色栓) D-異抗壞血酸酸性磷酸Elisa
灰略紅鏈霉 鄰苯二甲酸丁芐酯糖原合成Elisa
黑附球 鄰三聯(lián)苯糖原合成激Elisa
香栓孔 分散橙糖原磷酸化Elisa
擬蠶豆葡萄孢 螺旋霉天門冬氨酸氨基轉移Elisa
Carnobacterium 4,,4'-二氨基二苯砜脫Elisa
突孢毛殼 氟羅沙星脫1Elisa
假單胞屬 4-羥基苯甲脫2Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)