公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Aurora A和Aurora B抑制劑(ZM447439)
英文名稱:ZM-447439
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
ZM447439是ATP競(jìng)爭(zhēng)性Aurora A和B選擇性抑制劑,IC50分別為110nM和130nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):331771-20-1 純度:98.88% 分子量:513.59 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
總狀共頭霉(編號(hào)83778測(cè)序復(fù)核為大麗輪枝菌)絨毛蛋白抗體Anti-MAP3K1(MEKK1) Antibody癌易感蛋白2(BRCA2)
根白蟻傘囊泡谷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體Anti-MAP3K2 Antibody癌易感蛋白1(BRCA1)
小卷霉囊泡相關(guān)膜蛋白8抗體Anti-MAP3K20 Antibody癌抗雌激藥物耐藥性基因1(BCAR1)
涎沫假絲酵母纈酰-tRNA合成抗體Anti-MAP3K3 Antibody乳鐵傳遞蛋白(LTF)
弗雷德里克斯堡假單胞菌磷化鳥嘌呤核苷交換因子VAV3抗體Anti-MAP3K3 Antibody乳糖(LCT)
大腸埃希菌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體Anti-MAP3K7 Antibody乳脫氫C(LDHC)
Arthrobacter棕櫚?;さ鞍?抗體Anti-MAP4K1/HPK1 Antibody乳脫氫B(LDHB)
塔賓曲霉鳥嘌呤核苷交換因子VAV3抗體Anti-MAPK1 Antibody肉堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移2(CPT2)
美味側(cè)耳(紫孢側(cè)耳)突觸小泡膜蛋白同源樣蛋白1抗體Anti-MAP3K8 Antibody(PB1057)肉堿棕櫚?;D(zhuǎn)移1B(CPT1B)
釀酒酵母vp8蛋白抗體Anti-MAP4K5 Antibody肉堿棕櫚?;D(zhuǎn)移1A(CPT1A)
香菇血管活性腸肽受體-1抗體Anti-MAPK1/3 Antibody肉堿轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(CT2)
草青霉上皮型鈣粘附分子抗體Anti-MAPK13 Antibody肉堿乙酰轉(zhuǎn)移(CRAT)
枯草芽孢桿菌神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)肽VGF抗體Anti-MAPK11 Antibody肉堿-O-甲基轉(zhuǎn)移(CORT)
地衣芽孢桿菌T淋巴負(fù)調(diào)節(jié)蛋白抗體Anti-MAPK13 Antibody(PB0787)融合蛋白(FUS)
鐮刀菌屬魚、青鳉魚卵黃蛋白原抗體Anti-MAPK14(P38) Antibody溶質(zhì)載體家族3成員2(SLC3A2)
酒紅指孢囊菌血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體Anti-MAPK14(P38) Antibody溶質(zhì)載體家族39成員6(SLC39A6)
肌動(dòng)蛋白依賴染色質(zhì)調(diào)控因子SMARCD3蛋白抗體唾液鏈球菌大鼠腸巨噬細(xì)胞
2,,4-二氧乙除草劑抗體乳乳球菌葉蟬亞種大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞
尿轉(zhuǎn)運(yùn)型糖蛋白抗體橘橙指孢囊菌大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
轉(zhuǎn)綠調(diào)節(jié)因子SLTM抗體多刺鏈霉菌大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞
Aurora A和Aurora B抑制劑(ZM447439)炭角* 鹽酸環(huán)沙星磷酸果糖激1Elisa
凝結(jié)芽孢桿 吩噻磷酸烯式酮酸羧激Elisa
傷口埃希氏 磺異惡唑磷脂酰Elisa
赭褐鏈霉 2-萘酚-8-磺酸磷脂酰肌Elisa
寡養(yǎng)單胞 植酸鈣磷脂酰乙Elisa
亞灰光柄 磺對(duì)甲氧嘧啶硫酸角質(zhì)Elisa
香菇 對(duì)乙烯基愈瘡木酚卵黃蛋白原Elisa
哈茨木霉 富馬酸二甲酯球蛋白AElisa
桃花山類芽孢桿 磺甲氧噠球蛋白EElisa
釀酒酵母 黃苷-5'-單磷酸鈉球蛋白GElisa
解脂亞羅酵母 膠霉球蛋白MElisa
蟲草 鹽酸二甲雙胍尿苷二磷酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移Elisa
雞傷寒沙門氏 土霉檸檬酸合酸Elisa
葡萄狀穗霉屬 酮酸皮質(zhì)Elisa
蘋果鏈格孢 瑞格列奈蘋果酸脫氫Elisa