商品介紹:
AGK2是一個選擇性SIRT2抑制劑,,其IC50值為3.5μM。AGK2也可以抑制SIRT1和SIRT3,,且IC50值分別為30和91μM,。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:304896-28-4 純度:98.66% 分子量:434.27 儲存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:SIRT2抑制劑(AGK2)
英文名稱:AGK2
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
小鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒 ,英文名: ADP ELISA Kit
小鼠血管緊張素原(aGT)ELISA檢測試劑盒Mouseangiotensinogen,aGTELISAKit 96T/48T
人卷曲螺旋, 肌球蛋白樣BCL2 結(jié)合蛋白/自噬基因Beclin 1(BECN1)免疫試劑盒 Human BECN1 ELISA Kit
Ratadiponectin,ADPELISAKit大鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞TNFBETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次
Mouse17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISA試劑盒小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒 ,,英文名: IL-12/P40 ELISA Kit
魚類甲狀腺素(T4)ELISA檢測試劑盒FishThyroxine,T4ELISAKit 96T/48T
人1,25二羥基維3(1,25 DHVD3)免疫試劑盒 Human 1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25-dihydroxyvitamin D3 ELISA kit
英文名稱MouseCCL21ELISAKit小鼠CCL21規(guī)格:96T/48T
冰凍切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位染色試劑盒50次
RatEpinephrine/Adrenaline,EPIELISA試劑盒大鼠腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human collectin (Collectin) ELISA Kit 人膠原凝集素(Collectin)ELISA試劑盒
PorcinePulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforAlpha-SCA(HumanAlpha-sarcomericactin)ELISAKit人α橫紋肌肌動蛋白規(guī)格:48T/96T
血液甲戊二羥酸激酶(mevalonatekinase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Plaphosphatidicacid,PAELISAKit植物凝脂酸(PA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
SIRT2抑制劑(AGK2)Slitrk1 英文名稱: 神經(jīng)突出相關(guān)蛋白Slitrk1抗體 0.2ml
FAM61B 英文名稱: FAM61B蛋白抗體 0.2ml
絲氨酸蛋白酶抑制劑B7抗體 Anti-Megsin/SER—PINB7 0.1ml
Anti-ROS/FITC 熒光素標(biāo)記活性氧簇ROS抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PI3KCA(Tyr317) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體 規(guī)格 0.1ml
ADM 1-52/AM 1-52 (Adrenomedullin 1-52) 腎上腺髓質(zhì)素(1-52)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1mg