商品介紹:
E-7050是c-Met和VEGFR2的雙重抑制劑,,IC50值分別為14和16nM,。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:928037-13-2 分子量:633.69 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:c-Met和VEGFR2雙重抑制劑(E-7050)
英文名稱:E-7050
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究,;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究,;
④細胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細胞的起源與進化,;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
釀酒酵母Hansenula anomala
Paraburkholderia sp.Saccharomyces cerevisiae
大豆慢生根瘤菌Ashbya gossypii
毛木耳Crebrothecium ashbyii
香菇Saccharomyces cerevisiae
根瘤菌Saccharomyces cerevisiae
解脂亞羅酵母Torulaspora delbrueckii
球毛殼菌Saccharomyces cerevisiae
蠟狀芽孢桿菌Crebrothecium ashbyii
皺木耳Saccharomyces cerevisiae
粉紅單端孢Saccharomyces cerevisiae
圍小叢殼Saccharomyces cerevisiae
草木樨中華根瘤菌Metschnikowia pulcherrima
pSV-Beta-Gal Candida parapsilosis
韓芝Torulaspora hansenii
鞘單胞菌Debaryomyces hansenii
小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4(NRG4)免疫試劑盒促腎上腺皮質(zhì)激(1-39)抗體人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)假人參皂苷RT1
小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3(NRG3)免疫試劑盒促腎上腺皮質(zhì)激ACTH(18-39)抗體人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)堅牢藍BB鹽
小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG2)免疫試劑盒促腎上腺皮質(zhì)激ACTH (7-23)抗體人色上皮衍生因子(PEDF)劍麻皂苷元
小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG1)免疫試劑盒活性依賴的神經(jīng)保護肽抗體人色上皮衍生因子(PEDF)箭藿苷A
c-Met和VEGFR2雙重抑制劑(E-7050)SLC26A4 英文名稱: 鈉單獨轉(zhuǎn)運蛋白SLC26A4抗體 0.1ml
EPR1 英文名稱: 效應(yīng)細胞蛋白酶受體1抗體 0.2ml
嗜酸粒細胞趨化蛋白3抗體 Anti-CCL26 0.1ml
anti-VASH1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗血管抑制蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HER3(Tyr1328) 磷酸化HER3受體抗體 規(guī)格 0.1ml
CD24 CD24抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg