商品介紹:
英文名稱:SAR405 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg SAR405是一種PIK3C3/Vps34抑制劑,,IC50為1.2nM。SAR405是自噬機(jī)制的近端抑制劑,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1523406-39-4 純度:98.48% 分子量:443.85 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PIK3C3和Vps34抑制劑(SAR405)
英文名稱:SAR405
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
Pseudoxanthomonas動(dòng)力蛋白激活蛋白6抗體Human RERGL (Ras-related and estrogen-regulated growth inhibitor-like protein) ELISA KIT人α-黑色激(α-MSH)免疫試劑盒
絨奧德蘑脫2抗體Human RASSF1 (Ras association domain-containing protein 1) ELISA KIT人αS轉(zhuǎn)移(α-GST)免疫試劑盒
斑點(diǎn)青霉磷化DNA依賴性蛋白激抗體Human RHEBL1 (GTPase RhebL1) ELISA KIT人α干擾(IFN-α)免疫試劑盒
耐寒短桿菌防御α4抗體Human R3HCC1 (R3H and coiled-coil domain-containing protein 1) ELISA KIT人α-輔肌動(dòng)蛋白4(ACTN-4)免疫試劑盒
圈卷產(chǎn)色鏈霉菌DNA損傷結(jié)合蛋白1抗體Human SPDEF (SAM pointed domain-containing Ets transcription factor) ELISA KIT人α-輔肌動(dòng)蛋白3(ACTN-3)免疫試劑盒
炭疽健康皮張抗原DNA損傷結(jié)合蛋白2抗體Human RTBDN (Retbindin) ELISA KIT人α-輔肌動(dòng)蛋白1(ACTN-1)免疫試劑盒
凝結(jié)芽胞桿菌CD299抗體Human PEAK1 (Pseudopodium-enriched atypical kinase 1) ELISA KIT人α-防御4(NP-4)免疫試劑盒
巨大芽孢桿菌C型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體Human R3HDML (Peptidase inhibitor R3HDML) ELISA KIT人α淀粉(AMY1)免疫試劑盒
雅致放射毛霉C型凝集結(jié)構(gòu)域家族6成員A抗體Human PTK2B (Protein-tyrosine kinase 2-beta) ELISA KIT人α半乳糖基(α-Gal)免疫試劑盒
解淀粉芽孢桿菌B淋巴銜接分子DAPP1抗體Human RABGAP1 (Rab GTPase-activating protein 1) ELISA KIT人α半乳糖苷(αGAL)免疫試劑盒
微小根毛霉DNA1樣蛋白1抗體Human PINK1(Serine/threonine-protein kinase PINK1, mitochondrial) ELISA Kit人αN已酰基葡糖苷(αNAG)免疫試劑盒
根瘤菌抗菌蛋白DCD抗體Human PURB (Transcriptional activator protein Pur-beta) ELISA KIT人αL巖藻糖苷(AFU)免疫試劑盒
畢赤酵母肌動(dòng)蛋白解聚因子抗體Human REP15 (Rab15 effector protein) ELISA KIT人αL艾杜糖苷(IDUA)免疫試劑盒
斯瓦特貝赫山克里布所菌甘油二酯酰基轉(zhuǎn)移2抗體Human RABIF (Guanine nucleotide exchange factor MSS4) ELISA KIT人α2抗纖溶(α2-AP)免疫試劑盒
中國(guó)臺(tái)灣根霉DHX15蛋白抗體Human PURG (Purine-rich element-binding protein gamma) ELISA KIT人α2巨球蛋白(α2-MG)免疫試劑盒
頂孢頭孢霉DIAPH2蛋白抗體Human RALGPS1 (Ras-specific guanine nucleotide-releasing factor RalGPS1) ELISA KIT人α2-HS糖蛋白(AHSG)抗體免疫試劑盒
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,,基體:1%HNO3谷單鈉鹽
除烴海桿菌Marinobacter│hydrocarbonoclasticus 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:鵝去氧膽
日本慢生根瘤菌Bradyrhizobium│japonicum 質(zhì)量規(guī)格:1000µg/mL,基體:1%HCl去氧膽鈉
PIK3C3和Vps34抑制劑(SAR405)美澳型核果褐腐病 Phe-Phe磷酸化混合譜系激域樣蛋白Elisa
豬丹絲 聚(乙二)甲基烯酸酯甲基化Elisa
雅致栓孔 3,4-二甲基二苯甲酮二?;视王;D(zhuǎn)移Elisa
東方伊薩酵母 L-氨酸-15NCD47分子Elisa
白淺灰鏈霉 L-氨酸-15NCD42D分子Elisa
納瓦河部落奇異球 3-(三氟甲基)芐基硫磷酸烯式酮酸Elisa
綠色鏈霉 (S)-4-氨基-2-(叔丁氧羰基氨基)丁酸生長(zhǎng)促分泌受體Elisa
小孔異擔(dān)子 氮化鋯磷酸化鈣調(diào)依賴性蛋白激IVElisa
洛格酵母 聚乙烯吡咯烷酮絡(luò)合物組氨酸三聚體核苷結(jié)合蛋白2Elisa
黑曲霉 2,3-二氟-4-甲氧基苯甲丁酰酯Elisa
貝倫格勒座腔梨?;?/span> 2,6-二氟-4-甲氧基苯甲單核趨化蛋白5Elisa
海南吉爾霉 氮化銦(III)球蛋白DElisa
pLCDH-ciR 氮化鎵心肌肌凝蛋白抗體Elisa
甜芝(靈芝屬之一種) 去甲托品酮鹽酸鹽金黃色葡萄球Elisa
谷氨酸棒桿Ⅲ型 2-(二-叔丁膦)-2'-甲基聯(lián)苯促吞噬肽Elisa