商品介紹:
VT-464是CYP17裂解酶抑制劑,對h-Lyase的IC50為69nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1610537-15-9 別名:Seviteronel 純度:98.98% 分子量:399.34 儲存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CYP17裂解酶抑制劑(VT-464)
英文名稱:VT-464
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
枯草芽孢桿菌人型肝炎IgMAnti-TNFRSF6B Antibody人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)
變幻青霉大鼠游離狀腺原Anti-TNFRSF9 Antibody人降解加速因子(DAF)
庫德里阿茲威畢赤酵母人型肝炎IgGAnti-TNFSF10 Antibody人降解加速因子(DAF)
大腸埃希菌大鼠新生甲狀腺Anti-TNFSF11 Antibody人T活化連接蛋白(LAT)
香菇大鼠胰島Anti-TNFSF4 Antibody人T活化連接蛋白(LAT)
干草鞘單胞菌人糖蛋白130Anti-TNFSF12 Antibody人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)
球黑孢菌人促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子Anti-TNFSF8 Antibody人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)
異常畢赤酵母大鼠C肽Anti-TNKS1BP1 Antibody人B連接蛋白(BLNK)
蠟樣芽孢桿菌人去加壓/1-去基-8-右旋-精加壓Anti-TNIP2 Antibody人B連接蛋白(BLNK)
釀酒酵母大鼠絨毛膜促性腺激Anti-TNFSF9 Antibody人尿相關(guān)蛋白C(UreC)
水稻紋枯?。⒖萁z核菌)人蕈堿型乙酰受體亞型M3Anti-TNNI3K Antibody人尿相關(guān)蛋白C(UreC)
黑曲霉大鼠促黃體激Anti-TOMM20 Antibody人銜接蛋白活化因子1(APAF1)
阪崎氏年輕泰坦桿菌(阪崎克羅諾桿菌) 大鼠抗心肌抗體Anti-TOB1 Antibody人銜接蛋白活化因子1(APAF1)
亮白曲霉人睪受體Anti-TNNI3 Antibody人錨蛋白B(Ank-B)
戊糖乳桿菌大鼠抗中性粒/中心體抗體Anti-TNS3 Antibody人錨蛋白B(Ank-B)
嗜熱脂肪地球芽胞桿菌人蕈堿型乙酰受體Anti-TOMM20 Antibody人潛伏膜蛋白1(LMP-1)
紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白1抗體蘇云金芽孢桿菌抗青霉單克抗體7株
TH糖蛋白抗體蘇云金芽孢桿達(dá)可他亞種抗黃曲霉毒B1小鼠7
輔C還原核心蛋白1抗體核桃黃極毛桿菌抗人IgG小鼠7
泛結(jié)合E2變異體1抗體香菇?南陽8號抗補(bǔ)體C3小鼠7
CYP17裂解酶抑制劑(VT-464)納瓦河部落奇異球 去氧紫草
長雙歧桿 20-去氧巨大戟萜
大腸桿 7-羥基千金子二萜
木霉 芹糖異甘草苷
pGro7 芹菜-7-0-(2G-鼠李糖)龍膽糖苷
木賊鐮孢 5-羥色鹽酸鹽
嗜松青霉 七葉樹皂苷B
點(diǎn)柄乳牛肝 8-去乙酰基滇烏堿
泛養(yǎng)副球 羥基吳茱萸堿
枯草芽孢桿 去甲檳榔次堿
平菇 青蒿乙
葫蘆細(xì)基格孢 3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基黃酮
Sphingomonas 25-羥基原人參二
冷海水黃桿 1-羥基-2,3,4,7-四甲氧基山山酮
柯奈尼亞小單孢 去甲基川陳皮